【创新设计】（全国通用）2017版高考生物一轮复习 现代生物科技专题 第34讲 基因工程课件 新人教版选修3教案.pptVIP

③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。 (2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。 ②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶Sma Ⅰ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不是一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。 * [规范答题] 转基因育种是利用遗传转化方法将有价值的外源基因导入受体物种获得转化体，再将转化体植株经过常规育种程序加以选择和培育，最后选育出具有优良性状的新品种，对于作物育种具有重大的意义。图甲表示我国自主研发的转基因抗虫玉米的主要培育流程，图乙表示天然土壤农杆菌Ti质粒结构(部分基因及限制性内切酶作用位点如图所示)。请回答： * * 1.找错·纠错 错答序号：________　　正答：________ 错答序号：________　　正答： 错答序号：________　　正答： 错答序号：________　　正答： ① ⑤ ⑥ ⑧ Ⅱ 卡那霉素 四环素 害虫抗性接种实验法 * 2.错因分析 序号①未能考虑到限制酶Ⅰ也能识别限制酶Ⅱ识别位点中的“GATC”片段，因此，若使用酶Ⅰ切取质粒将会导致T－DNA片段全部切除 序号⑤、⑥忽视了四环素抗性基因片段中含限制酶Ⅱ识别位点，切割时已被破坏，而卡那霉素抗性基因并未被破坏 序号⑧错将“个体水平”答作“分子水平” 注　序号②也可答作Ⅰ(或“Ⅰ”或“Ⅱ”) * 第34讲　基因工程 2017备考·最新考纲 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。　2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。　3.基因工程的应用(Ⅱ)。　4.蛋白质工程(Ⅰ)。 * 考点一　基因工程的基本工具及操作过程 [自主梳理] 1.基因工程的基本工具 (1)限制性(核酸)内切酶 ①来源：主要从 生物中分离纯化而来。 ②作用：识别 并切开相应两个核苷酸之间的 。 原核 特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 * ③结果：产生 或平末端。 如下图所示，EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是 ，切割位点在 之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是 ，切割位点在 之间；说明限制酶具有 。 黏性末端 GAATTC G和A CCCGGG G和C 专一性 * (2)DNA连接酶 ①作用：将限制酶切割下来的DNA片段 。 ②类型 常用类型 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 T4噬菌体 功能 只“缝合” “缝合” 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 大肠杆菌 黏性末端 黏性末端和平末端 磷酸二酯键 拼接成DNA分子 * 双链环状DNA分子 限制酶切割位点 标记基因 动植物病毒 * 2.基因工程的操作程序 PCR 反转录法 化学 合成法 启动子 标记基因 * 农杆菌转化法 花粉 管通道 显微注射 DNA分子杂交 分子杂交 抗原—抗体杂交 个体生物学水平 * [跟进题组] 1.限制性核酸内切酶Mun Ⅰ和限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因，其中箭头所指部位为限制性核酸内切酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是(　　) * 解析　由图可知，质粒B上无标记基因，不适合作为载体；质粒C和D的标记基因上都有限制性核酸内切酶的识别位点。只有质粒A上既有标记基因，且Mun Ⅰ的切割点不在标记基因上。 答案　A * 基因工程操作基本工具的8个易错点 (1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。 (3)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。 (4)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。 (5)不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 * (6)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便进行检测。 (7)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内