2018学年高中生物第一部分微生物的利用第2课时分离以尿素为氮源的微生物同步备课课件浙科版选修.pptVIP

(4)下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是(多选) A.称取葡萄糖、琼脂糖等培养基成分 B.倒平板 C.涂布平板 D.微生物的培养 解析　进行微生物培养和分离时，倒平板、涂布平板均需要在酒精灯火焰旁进行，以防杂菌污染。 答案 解析 (5)与LB全营养培养基上的菌落数相比，尿素培养基上只有少数菌落的原因是 。 解析　尿素培养基只以尿素为氮源，在尿素培养基上生长繁殖的只能是少数能够合成脲酶可利用尿素的细菌。 土壤中能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量 答案 解析 第2课时　分离以尿素为氮源的微生物 第一部分　微生物的利用 考试要求 知识内容 考试属性及要求 考情解读 分离以尿素为氮源的微生物 加试 1.进行微生物分离。使用含有尿素的培养基，采用涂布分离法，分离有脲酶的细菌。 2.使用酚红指示剂检测以尿素为氮源的细菌的存在。 3.说明分离以尿素为氮源的细菌的实验原理。 4.举例说明本实验分离出来的细菌不一定都是以尿素为氮源的细菌。 一、实验目的、原理、设备、用品及材料准备 二、分离以尿素为氮源的微生物 内容索引 当堂检测 一、实验目的、原理、设备、用品及材料准备 基础梳理 1.实验目的 (1)使用专一的培养基(含有 )分离专一的细菌(有 的细菌)。 (2)利用指示剂颜色的变化检知酶( 酶)所催化的反应。 2.实验原理 (1)脲或称尿素，是 的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，利用尿素作为其生长的 。 (2)(NH2)2C＝O＋H2O ＋_____ 尿素 脲酶 脲 蛋白质降解 氮源 2NH3 CO2 3.设备及用品 灭菌锅或高压锅、250 mL的三角瓶1个和100 mL的三角瓶2个、封口膜和橡皮圈、培养皿4个、 和玻璃刮刀、恒温培养箱、摇床、酒精灯和 、一次性塑料手套、装有酒精棉球的广口瓶、镊子、有盖的试管(15 mm×150 mm)5支和试管架、 。 4.实验材料 (1)在100 mL烧杯中装入50 mL 70%酒精，将 浸泡在其中。 (2)在100 mL三角瓶中配制好25 mL (0.25 g蛋白胨，0.12 g酵母提取物，0.25 g NaCl和0.5 g琼脂糖，水25 mL)，加上封口膜后 待用。 接种环 超净台 移液器 玻璃刮刀 全营养LB固体培养基 灭菌 (3)在100 mL三角瓶中配制好25 mL尿素固体培养基(0.025 g葡萄糖，0.12 g NaCl，0.12 g K2HPO4，0.25 mg酚红和0.5 g琼脂糖，水15 mL)，加上封口膜后 ，待冷却至60 ℃时，加入通过 (使之无菌)的10 mL (内含2 g脲)，摇动，混合均匀后待用。 (4)将盛有4.5 mL 的5支有塞试管灭菌后待用。 (5)在250 mL三角瓶中装入99 mL蒸馏水，用封口膜盖上， 后待用。 (6)土样1 g(从 的地方取得)。 灭菌 G6玻璃漏斗过滤 尿素溶液 蒸馏水 灭菌 有哺乳动物排泄物 问题探究 1.为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？ 答案　琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养基上产生大量非以尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选，故而用经纯化的琼脂糖而不用琼脂做固化剂。 答案 2.分离以尿素为氮源的微生物实验所用培养基为 培养基。在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 ，提供氮源的是 ，琼脂糖的作用是 。 3.微生物要利用尿素需要分泌脲酶，不能分泌脲酶的微生物不能利用尿素。据此该培养基对微生物具有 作用，其选择机制是只有_____________ 的微生物才能在该培养基上生长。 答案 尿素固体 葡萄糖 尿素 凝固剂 选择 能够分泌脲酶 从而以尿素作为氮源