梅汝焕 缺氧试验.pptVIP

缺氧动物模型的复制 第二部分 目的（objective) 1.复制乏氧性、血液性缺氧动物模型及NaNO2中毒的解救方法。 2.观察不同类型缺氧在缺氧过程中皮肤和黏膜、血液及肝脏色泽的变化。 The Establishment of Animal Models of Hypoxia 材料和方法 (Materials and methods ) 1.1 实验动物（laboratory animal) ICR小鼠(mouse) ，40只，性别相同、体重23?2g 1 材料（ Materials） 1.2 药品(drug) 亚硝酸钠（ sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，MB）、 0.9％NaCl (physiological saline solution) 、 CO(carbon monoxide)。 1.3 器材( Experimental apparatus) 注射器、缺氧瓶 2.2. 乏氧性、 CO中毒性缺氧模型的复制 将20只小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的500ml密闭瓶中，注入10ml 空气；一氧化碳组小鼠放入500ml密闭瓶，注入10ml CO气体。记录实验前和实验过程行为（挣扎、痉挛）和耳、唇、尾的颜色。记录死亡时间和死亡小鼠肝脏颜色。 2. 方法 (Methods ) 注入10mL的CO 注入10mL的空气 2.2. 乏氧性、 CO中毒性缺氧模型的复制 注入气体夹闭通气口即开始计时，观察小鼠行为（挣扎、痉挛）及耳、尾、唇的颜色 记录小鼠死亡时间，如存活时间为另一组的2倍，即可处死，观察肝脏颜色 将20只小鼠随机分为亚硝酸钠组和亚硝酸钠治疗组。亚硝酸钠组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸钠0.2ml；亚硝酸钠治疗组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸钠0.2ml后即刻腹腔注射10g/L亚甲基蓝0.2ml 。 ip,5% NaNO2 0.2ml 放笼内，观察两鼠的不同变化，死亡 小鼠尸体留待打开腹腔观察 1％美兰 0.2ml NS 0.2ml 立即注射 美兰组如存活时间为NS组的2倍，即可处死 2.2.亚硝酸钠中毒性缺氧模型的复制及治疗 表2 乏氧和CO中毒小鼠存活时间 sample 体重（g） 　 存活时间（s ） 乏氧缺氧 CO 中毒 　 乏氧缺氧 CO 中毒 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 `x±s #DIV/0! #DIV/0! 　 #DIV/0! #DIV/0! 实验结果(results) 表3 亚硝酸钠中毒与解救小鼠存活时间 sample 体重（g） 　 存活时间（s ） NaNO2 NaNO2+MB 　 NaNO2 NaNO2+MB 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 `x±s #DIV/0! #DIV/0! 　 #DIV/0! #DIV/0! 实验结果(results) 表4.不同原因缺氧小鼠皮肤及肝脏颜色的特征变化 结果（results) 类 别 血液或肝脏的颜色 乏氧性缺氧 一氧化碳中毒 亚硝酸盐中毒 1.独立完成实验，不串岗，认真如实记录数据。 2.掌握正确捉拿小鼠的方法，防止被咬，注射美兰要注意防止露出污染环境。 要控制非处理因素对实验的影响 对照实验需动物体重相近（差别≤2g） 、性别相同 给药剂量、方法准确 测耗氧装置密闭性:实验前先检查装置是否漏气 读取数据准确，计时精准 实验报告可以按一般报告的格式书写，鼓励论文格式报告，但要求上交word格式，拒绝PDF格式报告。 注意事项 注意事项 器具须用水擦洗、擦干，按原样整齐放置，实验台须用湿的干净抹布擦拭干净。 安排2组值日：督查各组善后工作；扫地、拖地，凳子放整齐；清洁洗涤台、将动物尸体送动物中心。 谢谢 耗氧量测定原理 密闭瓶中的小鼠 O2 CO2 钠石灰 CaO+NaOH + NaHCO3+CaCO3 缺氧瓶中PO2 耗氧装置因瓶内负压，带动耗氧槽内的液体向缺氧瓶方向移动, 液体移动的刻度即为耗氧量. CaOH+NaOH+CO2→ NaHCO3+CaCO3+H2O 呼吸 不断消耗O2 PaO2 ＜ 60mmHg 缺氧死亡， 嘴唇青紫，解剖肝脏呈暗红色 化学感受器＋ （颈动脉体＋主动脉体） 呼吸加深加快 PaO2、氧含量、血氧饱和度↓ 动－静脉血氧含量差↓ 、脱氧Hb? 小鼠乏氧性缺氧模型 亚甲基蓝(美蓝）（methylene blue，MB） 亚甲蓝又叫美蓝，是一种氧化还原剂，它对血红蛋白有两种作用：高浓度时，使血红蛋白的亚铁氧化为高铁，生成高铁血红蛋白；相反，在低浓度时，可使高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。当亚硝酸盐中毒时可给予低剂量( 1mg/kg)亚甲蓝，使高