第十八章节色谱分析导论幻灯片.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1.分配色谱 基于样品组分在固定液（涂在载体上的液相）和流动相之间的分配进行分离。类似液-萃取分离液 气-液分配色谱 ，GC 液-液分配色谱，硅胶S1100+3，3’-二羟基丙晴，流动相正己烷 正相分配色谱和反相分配色谱 2.吸附色谱 利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别实现分离 固定相为吸附剂，多孔型微粒状物质，具有较大比表面积，表面有许多吸附中心，硅胶表面的吸附中心为硅羟基 流动相的洗脱能力主要由其极性决定，强极性流动相占据吸附中心的能力强，洗脱能力也强，使组分的保留值小， 流动相的洗脱能力用Snyder提出的溶剂强度定量表示 正戊烷0.00，氯仿0.26，乙醚0.43，乙睛0.52，甲醇0.70 气-固吸附色谱 液-固吸附色谱 3.离子交换色谱 根据被分离组分离子交换能力的差别实现分离 4.空间排阻色谱 也称分子排阻法，样品分子和固定相的表面无相互作用情况下，根据被分离组分分子的大小尺寸进行分离，洗脱次序完全是根据分子的大小进行 多空固体的特性用其比表面积，孔容，孔径分布来表征，孔的大小仅允许一定直径分子进入 硅胶（直径10微米），细孔凝胶，micropark TSKGel 40AX2柱，THF洗脱，分子量分布测定，对C6——C32的分离 洗脱液 二氯甲烷，甲苯，氯仿，四氢呋喃等，要求溶解式样和粘度小 第十八章 平面色谱 分类 ；薄层色谱，纸色谱，薄层和纸电泳 比移值 Rf = L/Lo 范围0——1 0.2——0.8适宜 0.3-0.5最佳范围 三、分离参数 分离度 L1，L2 为原点到斑点中心距离，d为两个斑点中心间距离，W1和W2为斑点宽度 色谱分离和薄层分离示意图 四、薄层色谱法 常规薄层色谱法（TLC） 高效薄层色谱法（HPTLC） 化学键合相薄层色谱法 胶束薄层色谱法 过压薄层色谱法 离心制备薄层色谱法 五、常规薄层色谱法 吸附剂 硅胶，氧化铝，硅藻土，县委系、纤维素，聚酰胺，葡聚糖凝胶 硅胶 商品硅胶，400-600m2/g，孔体积0.4ml/g，孔径100nm，硅胶H（不含粘合剂） 氧化铝 分为中性（pH7.5）碱性（ pH9.0 ）酸性（ pH4.0 ）；碱性氧化铝分离中性和碱性氧化物，生物碱，脂溶性维生素 中性氧化铝适合酸性与对碱性不稳定的化 合物 酸性氧化铝适合酸性化合物的分离 展开剂 水，酸，吡啶，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿，二氯甲烷，甲苯，苯，四氯化碳，环己烷，石油醚。 混合展开剂 *薄层色谱操作 薄层的制备 先选择吸附剂，再制成 软板或硬板（加有粘和剂） 点样 展开 斑点检测 定性 定量 直接定量法，洗脱和薄层扫描 六、高效薄层色谱法 与TCL比较 项目 板（cm） 粒度（um） 点样量（ul） 原点（mm） 斑点（mm） HPTCL 10 5 0.1-0.2 1-1.5 2-5 TCL 20 20 1-5 3-6 6-15 项目 展开距离（cm） 展开时间（min） N eff 检测限 点样数/板 HPTCL 3-6 3-20 5000 0.1-0.5 36 TCL 10-15 30-200 600 1-5 10 *应用 磺胺，氯仿-甲醇；巴比妥，氯仿-正丁醇-氨水；噻嗪类利尿剂，氯仿-乙醇-氨水 *纸色谱 谢 谢 * * * * * * * * * * * * * * * * * * 18.3.2.5. 塔板理论的成就和局限 塔板理论中的理论塔板数和板高按在色谱柱效评价中具有重要实用价值。 然而，色谱是一个动态过程，区别于萃取、精馏等分级过程，不可能实现溶质在两相间真正分布平衡；忽略扩散、传质、瞬间实现平衡的假设也不符合色谱过程分子运动规律