细胞凋亡与疾病-高级病生幻灯片.pptVIP

细胞凋亡不足有关的疾病 细胞凋亡增多有关的疾病 １.恶性肿瘤 滤泡性淋巴瘤、P53突变的各种癌肿、激素依赖性肿瘤、乳腺瘤 、前列腺癌 卵巢癌、白血病 １.艾滋病 ２.神经变性性疾病 早老性痴呆症、帕金森氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、小脑退化症 ２.自身免疫性疾病 系统性红斑狼疮、免疫介导性肾小球肾炎 3.缺血性损伤 心肌梗死、脑卒中、 　缺血后再灌注损伤 ３.病毒感染性疾病 疱疹病毒病 4.骨髓发育不全综合症 　再生障碍性贫血 * 细胞胀亡的早期,细胞膜通透性发生改变、细胞肿胀、胞浆发生空泡(有别于凋亡早期的细胞皱缩、胞浆浓缩及出芽改变) 、细胞器崩解、线粒体在早期可正常或致密,后期的改变与凋亡趋于一致,发生絮状改变或钙化。胀亡的细胞核内染色质早期浓集晚期出现核溶解及内容物溢出,胀亡细胞周围出现明显的炎症反应。而凋亡的晚期胞膜皱缩内陷、分割包裹、形成凋亡小体,周围不出现炎症反应。胀亡的形态学特征是细胞肿胀，体积增大，肿胀波及细胞核、内质网、线粒体等胞内结构（肿胀的细胞器以线粒体最为显著），胞膜起泡，细胞膜完整性破坏[19]。胀亡细胞周围有明显炎症反应 。 当需要强调细胞的死亡过程和方式时，可以使用胀亡和凋亡等概念来表述口1：坏死前细胞表现为凋亡特征可称之为凋亡样坏死(apoptotic necrosis)；表现为胀亡特征，称为肿胀样坏死(oncofic necrosis)；当其特征无法确定或死亡过程未知时，则可以直接表述为坏死(necrosis)；有时需要形象地说明细胞形态的变化，也可以继续使用细胞浊肿、水样变、气球样变等概念。 胀亡可以是生理性的，如胚胎发育过程中指趾蹼的消失主要依靠胀亡来实现，骨结构主要通过骨细胞的胀亡得到重建；也可以是病理性的，如胰腺炎时，胰腺细胞胀亡导致细胞内酶大量泄漏，导致周围组织的进一步损伤 * * 内钙释放可以使细胞内钙离子浓度迅速达到峰值，但维持时间较短，调节短期效应，如收缩、分泌等 而外钙内流则可使细胞内钙离子浓度持续升高，从而调节长期效应，如基因转录，细胞生长等。 * * * * ● 氧化应激可激活Ca2+/Mg2+依赖的核酸内切酶，也可产生膜的发泡现象。 ● 氧化应激引起细胞膜结构的破坏，可改变细胞膜的通透性使Ca2+内流增加，诱导细胞凋亡。 自由基对线粒体膜损害导致其通透性和膜电位的变化诱导细胞凋亡。 ● 氧化应激可活化核转录因子NF-kB和AP-1，可加速细胞凋亡相关的一些基因的表达，诱发细胞凋亡。 ● (二)钙稳态失衡引起细胞凋亡的可能机制： ● 激活Ca2+/Mg2+依赖的核酸内切酶，降解DNA链； ● 激活谷氨酰胺转移酶，催化细胞内肽链间的酰基 转移，在肽链间形成共价键，使细胞骨架蛋白分 子间发生广泛交联，有利于凋亡小体形成； ● 激活核转录因子，加速细胞凋亡相关基因的转录； ● Ca2+在ATP的配合下使DNA链舒展，暴露出核小体 之间的连接区内的酶切位点，有利于DNA内切酶切 割DNA。 Bcl-2 (－)(－) 线粒体 PTP开放 Apaf+Cyt.C Caspase-9酶原 Caspaes-9 △ψm下降 Caspase-3酶原 Caspase-3 Caspase抑制剂 AIF 蛋白质水解 无活性核 酸内切酶 细胞凋亡 核酸内切 酶激活 DNA断裂 Ca2+ NO 缺血 缺氧 活性氧 （+） (－) （+） （+） （+） (－) （三）线粒体损伤在细胞凋亡中的作用 2002年10月7日英国人悉尼·布雷诺尔；美国人罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿，因在器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究获诺贝尔诺贝尔生理与医学奖。 2002年诺贝尔生理与医学奖获得者（图片来自http://www.nobel.se/） 细胞凋亡检测方法 基于形态学观察的染色法 基于DNA 片断化的检测法 膜联蛋白检测法 Caspase酶分析法 流式细胞仪定量分析法 五.细胞凋亡常用的研究方法 （一）细胞凋亡的形态学研究方法 1、光学显微镜和倒置显微镜　（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。　（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、