仪器分析2.紫外-可见吸收光谱法幻灯片.ppt

D. 苯及其衍生物：π→π* λmax~255nm εmax~200 λmax~204nm εmax~800 λmax~180nm εmax~60000 2.4 紫外分光光度计 2.4.1 基本组成 光源 单色器 样品室 检测器 显示 1．光源： 钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 棱镜——对不同波长的光折射率不同 色散元件 分出光波长不等距 光栅——衍射和干涉 分出光波长等距 3．吸收池： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 5．记录装置：讯号处理和显示系统 2.4.2. 紫外-可见分光光度计仪器的类型 1. 单光束分光光度计 优点：结构简单、价格低廉． 缺点：受光源、检测器的波动影响：不能自动记录吸收光谱。 2. 双光束分光光度计 优点：能自动记录吸收光谱（自动扫描）；比切光器的频率慢的光源、检测器的波动不影响；是目前用得最多的分光光度计． 3. 双波长分光光度计 优点：可以测定较高浓度的样品溶液； 可以扣除背景吸收（样品池、浑浊等）； 比切光器的频率慢的光源、检测器的波动不影响； 导数吸收光谱曲线（??=1~2nm)。 2.5 光的吸收定律 2.5.1. Lambert – Beer 定律 １.光吸收定律的表达式及其含义 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系： A ∝ b 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系: A ∝ c 二者的结合称为朗伯-比耳定律，其数学表达式为： A＝－ lgT ＝ － lg（ It / I0)= ε b c? 式中：A：吸光度；T:透射率； 　　　b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； 　　　c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L-1； 　　　ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1； A．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光， 溶液是稀溶液 B．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定 注意： 2. 摩尔吸光系数ε 吸光物质的特征常数ε(λ)；在最大吸收波长λmax处，常以εmax表示 。 在温度和介质条件一定时，ε 仅与吸光物质的结构与性质有关，可作为定性鉴定的参数； 不随浓度c 和光程长度b 的改变而改变：ε＝ b c?/ A。 吸光能力与测定灵敏度的度量； εmax越大表明该物质的吸光能力越强，测定的灵敏度越高。 ε105： 超高灵敏；C= A/ε b 0.01/105=10-7 mol/L ε=(6～10)×104 ：高灵敏C= A/ε b =0.01/5 ×104= 2×10-7 mol/L ε104 ： 不灵敏； C= A/ε b 0.01/104= 10-6 mol/L 2.5.2 . Beer 定律的的局限性 １.仪器偏离　　　单色光 Lambert – Beer定律的前提条件之一是入射光为单色光。 但实际上难以获得真正意义上的纯单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光谱通带。复合光可导致对朗伯-比耳定律的正或负偏离。 1.0 0.5 0 A C 正偏离 负偏离 ２.浓度的限制　　　　稀溶液 ３.化学偏离 恒定的化学环境 ４.非均相体系偏离 真溶液 2.6 紫外可见分光光度法的应用 定性分析 定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 2.6.1 定性分析 利用紫外吸收光谱对有机化合物进行定性鉴定的主要依据是：这些化合物的光谱吸收特征。鉴定的主要参数包含：吸收光谱形状，吸收峰数量，各吸收峰的最大吸收波长以及相应的摩尔吸光系数。 对有机物进行定性鉴定的主要步骤: （1）将试样尽可能提纯，以除去干扰杂质； （2）绘制已提纯试样的吸收光谱，由其光谱特征依据初步判断； （3）根据对比法对该化合物进一步定性鉴定； （4）应用其他化学、物理、物理化学等分析方法进行对照和验证。 根据吸收光谱进行初步判断的一般规律： （1）如果该化合物在220--800nm波长