家畜组织学与胚胎学 实验教案.docVIP

《家畜组织学与胚胎学》实验教案 实验一 显微镜的构造和使用及血涂片的制备和观察 一、显微镜的构造和使用（一）实验目的与要求 了解生物学显微镜的构造，掌握其使用方法。（二）材料与方法 1.材料 生物学显微镜、小肠切片、二甲苯、松节油、擦镜纸 2.方法（1）生物学显微镜的构造 包括机械和光学部分。 机械部分①镜座：支持镜体。②镜壁：连接镜筒与镜座。其调节螺旋可调节载物台升降。③载物台：固定标本。④标本推进器：位于载物台上，固定切片。其调节旋钮可前后左右移动切片。⑤镜筒：上接目镜，下连物镜转换器。⑥物镜转换器：转换不同放大倍数物镜。⑦调节螺旋：粗调节螺旋用于调焦低倍镜，细调节螺旋用于调焦高倍镜。 光学部分①接物镜：用于第一次放大。镜管上标有主要性能参数，其中，4×、10×为低倍镜，40×为高倍镜，100×为油浸镜；40/0.65，40 示放大倍数，0.65 示镜扣率；160/0.17，160 示机械管长（mm），0.17 时盖玻片厚度（mm）。②接目镜：将物镜放大的标本像再放大为虚像。镜管上标注参数 5×、10×、15×和 20×等，均为放大倍数。③聚光器：主要作用是聚光。④光阑：位于载物台下方，其调节杆可控制聚光镜的分辨率。⑤滤光片：在光阑下方，通过置换不同的滤光片，改变光源的色调和强弱，便于观察和拍照。⑥光源：内置光源。（2）显微镜的使用 ①显微镜的提取和放置：一手握镜壁，一手托住镜座，平放于左前方。擦净纸蘸少许二甲苯 或无水乙醇擦拭目镜和物镜， ②对光：将物镜对准通光孔，灵活应用光阑、滤光片及广源，将视野调至合适。 ③观察切片：将盖玻片朝上的切片置于载物台上，固定，将组织块对准通光孔，从低倍起逐 渐切换物镜至高倍，观察切片组织块的结构，并绘图。 ④收藏：观察完毕，移开物镜，取下切片，放入切片盒，下降镜筒，套塑料套，放入显微镜 箱。 （3）成像原理 其成像原理是两次连续放大成像。第一次物镜放大成一实像，第二次目镜放大成一倒立 的虚像。因此，标本的放大倍数应是物镜放大倍数×目镜放大倍数。（三）作业 任取一 HE 染色切片，在低倍镜和高倍镜下熟练找到图像。 二、血涂片的制备和观察（一）实验目的与要求 学会制备血涂片，掌握 Wright’s 染色。（二）材料与方法1.材料 全血（家兔、鸡）、肝素、Wright’t 染液、磷酸盐缓冲液、5mL 注射器、针头、5mL 试管、载玻片、盖玻片、显微镜2.方法（1）准备 用洗洁精洗净载玻片和盖玻片，自来水冲洗，95乙醇浸泡 1h，干燥，备用。 配置 Wrigh’t 染液、磷酸盐缓冲液。（2）采血 试管中加入肝素 0.5mL 后，采血样 2-3mL，摇匀待用。家兔耳静脉采血，鸡翅静脉采血。（3）推片 在载玻片右侧滴 1 滴血，将 1 盖玻片至于血滴前方，接触血滴，盖玻片与载玻片呈 30-45°角，推片，干燥。（4）Wright’t 染色 在血膜上滴加 Wrigh’t 染液，染色 1-2min。再滴加等量的磷酸盐缓冲液，2-3min 见表面有金属光泽时，用清水轻轻冲去染液，干燥血膜。（5）镜检 先在低倍镜下观察，然后换高倍镜或油镜观察。（三）作业 在显微镜下观察红细胞（家兔红细胞无核、鸡红细胞有核）和各种白细胞，绘高倍镜图。 实验二 四大组织的形态结构一、 实验目的与要求 观察、掌握被覆上皮、结缔组织、血液、肌肉及神经组织的形态结构特点。了解几种腺上皮细胞、神经末梢及神经胶质细胞的形态结构。 二、观察切片 （一） 上皮组织 观察切片单层柱状上皮、假复层柱状纤毛上皮及复层扁平上皮形态结构，示范切片单层 扁平上皮、立方上皮、变异上皮及腺上皮。1.单层柱状上皮 细胞呈柱状（侧面观）或多角形（表面观）；细胞游离缘有密集的微绒毛，构成纹状缘；多角形表面外有带状的闭锁堤（是细胞间的一种连接结构）；细胞器丰富；核椭圆形，位于基底部。2.假复层柱状纤毛上皮 细胞排列似多层，但基底部均附着于基膜，实为单层；由柱状细胞、梭形细胞、锥形细胞和杯状细胞构成，核位置参差不齐；柱状细胞表面有大量纤毛；基膜厚。3.复层扁平上皮 表层细胞呈扁平状；中层细胞呈梭形或多边形；基底细胞为矮柱状，有增殖能力；基底面凹凸不平，与结缔组织相连。4.单层扁平上皮 细胞呈梭形（侧面观）或锯齿形（表面观），核椭圆，胞质少，细胞器不发达。5.立方上皮 细胞呈立方形（侧面观）或多角形（表面观），核圆居中。6.变异上皮 细胞为多层，细胞形状和层数因器官功能状态不同而异。如排空的膀胱，上皮厚，细胞层数增多，细胞呈大的立方形；充盈的膀胱，上皮薄，细胞层数减少，细胞呈扁梭形。7.腺上皮 有浆液腺、粘液腺及混合性腺。（1）浆液腺 由浆液型细胞构成。浆液细胞呈锥体形，顶部含嗜酸性酶原颗粒，呈红色，基底部嗜碱性，呈蓝色。核圆形，位于基底部，核上方有高尔基复合体和酶原