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肝胆免疫 检验科 张正 提纲 方法学的进展 从甲肝到戊肝检测及研究进展 其它内容： EBV，CMV，HGV，TTV 一 方法学进展 病原检测 经典方法： 培养 形态电镜 （HBV，HCV均未成功） 免疫学检查 EIA（夹心法，竞争抑制法， 捕获法），RIA 敏感，特异，重复性好。 RIA较EIA敏感103， 但缺点： 污染 半衰期 方法：注意原理，适用范围，评估 分子生物学方法 核酸成分 基因图谱 探针杂交 PCR 序列分析 抗体检测 免疫学方法：EIA，RIA 二 从甲型到戊型肝炎免疫检测 HA HB HC HD HE HA HAV 1993年定名，微小病毒科嗜肝病病毒属 形态：27nm 球型，正20面体，32个壳粒 分子生物学特点： 单股正链RNA，7500bp 基因结构模式： 5`-NC-P1-P2-P3-NC- PolyA-3` 临床： 潜伏期6周，急性起病，常高热，黄疸，消化道症状（恶心，呕吐，食欲不振），三个月恢复。 检测： 抗HAV-IgM 确诊标志 抗HAV-IgG （与IgM伴随；流调） HB HBV 1991年定名，嗜肝病毒科 形态：42nm球型（Dane颗粒）小球及管型 分子生物学特点：不完整环状DNA,3200bp 5端11bp重复结构： LTR 5-TTCACCTCTGC-3 4个ORF： S（Pre), C(Prec), X, P 特点： 重复利用率150% 全部调控结构位于其内 多变性 检测标志物： HBsAg,抗-HBs,HBeAg,抗-Hbe, 抗HBc(IgG,IgM),HBV-DNA 临床： （多样），急性，迁延，慢性，肝纤维化 检测 S Ag HBsAg HBV感染确证标志，各期均可见 Ab 抗HBs 痊愈，免疫成功，保护性抗体 e Ag HeAg 传染性标志常与HBV-DNA共存 Ab 抗Hbe 部分获得免役，临床常稳定， 多有病毒与肝细胞整合 C Ag 不在血内出现，仅肝穿病理能查 Ab 抗HBc 感染标志，与其它配合，特别高浓度应查HBV-DNA 抗HBc-IgM 急性期有助诊断，慢性活动可升高 其它：X系统，PreS1,PreS2 HBV-DNA:阳性是病毒最确切存在标志，定量有助疗效观测 HC HCV 1998年定名，与人类黄病毒类似 形态：尚缺乏资料 分子生物学特点：单股正链DNA，9500bp 临床： 易慢性化，输血后为主，隐袭，临床常呈地震型 检测： 抗HCV 感染标志 HCV-RNA 病毒存在确证，用RT-PCR检测，不能测Ag HD HDV 缺陷病毒，依赖HDV酶系统复制 临床 与HBV感染共存，有流行性， 常引起重症肝炎 检测 HDV，抗HDV 感染标志 HDV-DNA 病毒存在确证，科研 HE HEV 单股RNA，7500-7600bp，3个开放读码，杯状，与黄病毒属类似，核心32-34 ，表面不平 临床： 急性传染病。危害青壮年。男高于女。较甲肝比，病死率高，传染性低。 检测： HEV PT-PCR 抗HEV 目前感染标志 HEV-RNA 病毒存在 科研 小结 粪口途径：HA，HE 血液途径：HB，HC，HD 另注意病毒核酸分类，主要检测标志的临床意义 三 其它 HGV 20%非甲-戊，1995年，Simons,差式PCR发现。从GB肝炎患者感染黑猩猩后，从急性期动物血清中克隆出2株新病毒。GBV-A，GBV-B，同源27%，与HCV同源47.2-57.0%。 另一组科学家发现GBV-C。 病毒：有包膜，单股正链RNA，直径 GBV A B C bp 9493 9143 9000 临床：阴袭，有流行性（北京0.1%） TTV 1997年，日本人报导，DNA病毒 研究结果：正常人携带率22%，独立致病性差，对已有肝炎者的作用不祥。目前尚未承认为独立病毒。 CMV DNA疱疹类病毒。可独立引起CMV肝炎。 标志检测 抗CMV-I