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专题限时集训(十六)　第16讲　现代生物科技专题 1.某质粒上有、、三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图Z16-1所示，请回答下列问题： 图Z16-1 (1)在构建重组质粒时，应选用________和________两种限制酶对____________________进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。 (2)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加________________，理由是______________________________________________。 (3)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用__________________技术，即通过________和________两个主要过程最终形成完整植株。 2如图Z16-2是利用生物工程的方法生产人血清白蛋白的示意图。图中展示了人血清白蛋白基因和质粒上的限制酶切割位点及质粒上的抗生素抗性基因，其中和分别为氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因。图中展示的限制酶切割产生的黏性末端均不相同。据图回答： 图Z16-2 (1)早期的基因工程操作都用原核生物的细胞作为受体细胞，是由于原核生物具有一些其他生物没有的特点，如__________________________________。 (2)为了防止酶切产物自身环化等现象，通常采用______(填“单”或“双”)酶切处理目的基因和载体，据图应选择限制酶__________________。 (3)为了筛选含有表达载体的大肠杆菌，应将转化产物先涂布在含有________________的培养基中____________的培养基中进行培养。最后根据在两种培养基中的生长状况来选择，应选择__________________________________________________的菌落作为后期研究对象。 (4)可利用克隆技术来培育能产生人血清白蛋白的小鼠，通过该技术产生的个体与核供体的遗传物质________(“完全相同”或“基本相同”)。 (5)为了提高已有胚胎的利用率，可采用____________技术处理，若操作对象是囊胚________________________。 克隆猪成功的概率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图Z16-3所示。 图Z16-3 (1)图中应选择__________________________期的卵母10代以内的细胞，原因是__________________________________________。 (2)图中X表示________过程，从基因组数据库中查询Bcl-2基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成________用于PCR扩增，PCR的原理是__________________。在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数，从而反映出______。 (3)克隆猪的性状与良种猪的性状不完全相同的原因是______________________________________________________________________________________(答出2点)。 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的基因工程、细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请完成下列相关问题。 (1)动物细胞培养技术需要无菌、无毒环境，________，温度和pH适宜，气体环境等条件。 (2)超数排卵的处理措施是对供体母牛注射__________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的________冲洗出来。 (3)和受精有关的过程：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核融合。其正确的顺序为____________(填序号)。 (4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，需构建目的基因表达载体。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的________(______________。 (5)在试管羊和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有______________________________________________________(写出两项)。 基因的表达产物Bt毒蛋白有杀虫效果好、安全、高效等优点。如图Z16-4为培育转Bt基因苗的基本操作过程。 图Z16-4 (1)Bt基因可从cDNA文库中获取，从前者获取的基因______