人教版高中生物选修1专题五课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 课件 (共16张PPT).ppt

【课题背景】 在刑事侦破案件中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。现在PCR技术已广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和基因测序。 【目标解读】 1.理解PCR的原理、条件和反应过程 2.尝试PCR技术与细胞体内DNA复制的过程 DNA化学组成 P 脱氧核糖 含氮碱基 组成元素：C、H、O、N、P 基本单位：脱氧核糖核苷酸 鸟嘌呤（G） 腺嘌呤（A） 胞嘧啶（C） 胸腺嘧啶（T） DNA全称：脱氧核糖核酸 1 2 5 4 3 磷酸基团（在 5 的位置上） DNA复制的方向 引物 DNA母链 DNA的复制方向总是从子链的5’端向3’端延伸 引物从模板链3’端结合 思考：为什么需要引物？ 因为DNA聚合酶不能从头开始DNA复制。 DNA聚合酶只能从引物3? 端延伸DNA链（合成子链）。因为DNA聚合酶只能将新的核苷酸加到已有的DNA双链上，所以DNA复制需要引物。 从中选出适合的引物进行PCR: (1)CCTAGA~~~ (2)GTTCGC~~~ (3)AAAGT~~~ (4)TTTCA~~~ 3? 5? 5? 3? 结论： 1、引物结合在母链的3端。 2、复制不是从头开始。 3、DNA聚合酶从引物3端开始结合上去 4、子链DNA延伸的方向从5到3 （1）CCTAGA （3）AAAGT 1、 PCR（多聚酶链式反应）技术：体外模拟DNA复制的技术。 2、原理： 二、PCR原理 利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 DNA双链 单链 变性（加热80-100℃ ） 复性（缓慢冷却） 重复30次 1 步骤：变性 —— 复性 —— 延伸 三 PCR的反应过程 90 ℃以上 50 ℃左右 72 ℃左右 2 体外PCR扩增DNA的条件： 模板： 原料： 酶： 引物： DNA的两条链 四种脱氧核苷酸 TaqDNA聚合酶 引物Ⅰ、引物Ⅱ 在一定的缓冲液中进行 严格控制温度 模板DNA 3? 3? 5? 5? 三 PCR的反应过程 5? 50℃ 引物1 引物2 5? 5? 3? 3? 5? 3? 3? 95℃ 三 PCR的反应过程 5? 引物1 引物2 5? 5? 3? 3? 5? 3? 3? 72℃ Taq酶 Taq酶 子链 子链 第1轮结束 第2轮开始 三 PCR的反应过程 PCR技术的操作过程