人教版高中生物选修3第一章DNA重组技术的基本工具（课件26张(共26张PPT).ppt

知识回顾 脱氧核苷酸 脱氧核糖 N P 1.1 DNA重组技术的基本工具 三种基本工具 手术刀 缝合针 运输车 知识回顾:基本工具 限制性核 酸内切酶 原核 双链DNA分子中特定的核苷 酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 DNA连接酶 磷酸二酯键 载体 质粒 动植物病毒 能在受体细胞中复制并稳定保存 具有一至多个限制酶切割位点， 供外源DNA片段插入 具有标记基因，供重组DNA 的鉴定和选择 思考： 在实际操作中，载体的这些特点是如何满足实际需求呢？ 活动一：模拟重组操作 提供的物品：剪刀、深色胶带、载体--环状DNA(蓝色)、 含有目的基因的DNA片段（红色）、 提示：剪刀无情，请小心。 将多个酶切后的载体与目的基因混合后，加入DNA连接酶，其产物有哪些种？尝试操作，得出结论。 各小组挑出本组制作的重组DNA，互相观察并比较是否相同？ 为什么会出现这么多连接产物呢？ 我们如何解决目的基因定向插入这个问题呢？ 思考问题 载体的特点之一是有多个不同的酶切位点 活动二：改进重组操作 提供的物品：剪刀、绿色胶带、载体--环状DNA、含有目的基因的DNA片段 提示：剪刀无情，请小心。 酶切后的载体和目的基因 载体与载体的连接 重组结果 目的基因与目的基因的连接 载体与目的基因的连接结果 结论 载体上含有多个酶切位点，利用双酶切的方法，可以保证目的基因的定向插入，同时避免了载体及目的基因自身环化，提高DNA重组率，实现目的基因的正确转录和表达。 思考： 如何避免载体和载体以及目的基因和目的基因间连接的结果出现呢？