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第十一章 植物离体无性繁殖 1植物离体无性繁殖的概念和特点 植物两种基本生殖方式有性生殖和无性生殖。有性生殖是经过雌、雄性细胞融合而发育成合子胚或种子，并用种子繁殖后代的，如小麦、水稻、玉米的繁殖。无性生殖是不经过雌、雄性细胞融合而直接用营养体细胞繁殖后代，如甘蔗、甘薯、土豆的繁殖。由于是高度杂合的，大多数果树和观赏植物甘蔗、甘薯、因此它们的种子后代不可能(克隆)。在自然界中，无性繁殖的途径有二一是无融合生殖，即不经过减数分裂 无融合生殖被子植物未经受精的卵或胚珠内某些细胞直接发育成胚的现象。不经过雌、雄性细胞融合直接由营养体细胞或细胞发育成无性胚或无性种子包括：（1）孤雌生殖。卵细胞不经受精直接发育成胚的现象。孤雌生殖有两种类型一种是由经过减数分裂的胚囊中的单倍体卵细胞发育成胚，这样的胚长成的植物体不能产生后代。这种类型在自然界罕见。另一种是由未经减数分裂的胚囊中的二倍体卵细胞发育成胚。如蒲公英。（2）无配子生殖。由胚囊内卵细胞以外的非生殖性细胞，如助细胞、反足细胞或极核等直接发育成胚的现象。见于韭、含羞草、鸢尾等植物。（3）无孢子生殖。由珠心或珠被细胞直接发育成胚的现象。见于柑桔属、高粱属等植物无融合生殖只发生在少数几个物作为植物营养繁殖的一个新手段，组织培养技术现正日益普及。利用植植物离体繁殖(propagatin in vitro)。植物离体繁殖又称植物快繁或微繁(micrpropagation)，植物快繁与传统营养繁殖(vegetative prpagation)相比，其特点表现在：①繁殖效率30m2的培养室可同时存放1 2植物快繁的器官形成方式 植物种类、外植体类型及培养基组成等都影响着接种材料的生长、分化和再生，使外植体的 2.1短枝发生型 短枝发生型是指外植体携带的带叶茎段，在适宜的培养环境中萌发，形成完整植株，再将其。 丛生芽发生型(或)。将丛生苗分割成带芽茎段，继代培养，重复芽苗增。不定芽发生型 是在茎尘严格地不定芽发生型(adventitous bud formation)是指外植体在适宜培养基和培养条件下，经过脱，将芽苗转移到生根培养中，经培养获得完整植株的繁殖对于植物的无性繁殖而言，由离体器官直接形成不定芽，比通过愈伤 不定芽发生型是许多植物快繁的主要方式。由于不定芽形成的数量与腋芽数目无关，其增8代之内，再生植株的变异率则可控制在3％左右。Mme Salleron也是一个嵌合体，。胚状体发生型 图—1），或外植体表皮细胞直接 图—1愈伤组织经诱导形成的体细胞胚状体 a.当归愈伤组织形成的胚状体b.葡萄愈伤组织产生的体细胞胚(引自Robert N.Trigiano2000) 胚状体发生途径具有成苗数量大、速度快、结构完整的特点，因而是外植体增殖系数最大的体细胞胚再生的小植株与丛生芽或不定芽再生的小植株相比，具有两个显著差异：①胚原球茎发生型 原球茎发生型是兰科植物的一种快繁方式，它是指茎尖或腋芽外植体经培养产生原球茎(即)的繁殖类型。原球茎是短缩的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、类似，它可以增殖，形成原球茎丛。由茎尖或腋芽外植体诱导产生原 原球茎繁殖体系是兰花惟一有效的大规模无性繁殖方法。该方法是1960年由法国学者G.Morel开创的，促使了兰离体无性繁殖是一个相当复杂的过程，包括好几个步骤或阶段。Murashige(1978)提出，可以把商业上进行无性繁殖的整个过程分为4个不同的无菌培养物的建立；阶段Ⅱ茎芽的增殖；阶段Ⅲ4个阶段中前3个都是在无菌条4个则是在温室环境中完成的。后来，Debergh和Maene(1981)之前再加上一个阶段O，其间要把供体植株在仔细监控的环境条3个月，并且要采取措施减少供体植物的表面污染和内生菌污染。 无菌培养物的建立这个阶段的任务母株和外植体的选取、无菌培养物的获得及外植体的启动生长，以利于离是植物快繁能否成功的重要一母株和外植体的选取 用来进行繁殖的材料，其母株(stock plant)应选择性状稳定、生长健 在一定程度上，用于离体繁殖的外植体的性质，是由所要采用的茎芽繁殖方法决定的。例如，为了增加腋生枝的数目，就应当使用带有营养1 mm长的茎。不过，倘若母株是无毒的，或是不需要脱毒，最适根据一般经验，茎尖以下的较老节段对于杀菌剂毒性的忍耐力比顶端要强Miller和Murashige(1976)在铁树和龙血树的培养中使用的是顶在切取外植体的当时供体植株的生理状态，对于芽的反应能力有明显的影对于需要低温、高温或特殊的光周期才能打破休眠的鳞茎、球茎、块茎和其1l℃冷处理6～8周的水仙鳞在通过形成不定芽进行快繁的时候，无论是否要经历愈伤组织阶段，都可用在愈伤组织培养中，正确选择外植体对茎芽的分化也起很大作用。在柠檬桉(1ignotube