专题二 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.pptVIP

(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。 (6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止营养物的扩散。 【答案】　(1)温度　酸碱度　易培养　生活周期短 (2)灭菌　消毒　损伤DNA的结构 (3)比例合适　(4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (6)灭菌 探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。 实验原理　农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。 例2 材料用具　农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干。无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。 方法步骤 (1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在________操作。 (2)制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用 无菌移液管吸取上清液1 mL，转至9 mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰________cm处。 (3)涂布。按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布________个平板。 (4)培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3～4 d。一般每隔________小时统计一次，选取________时的记录作为结果，这样可以防止________________________________________________________________________________。 (5)细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是________。(稀释度是105) (6)预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数________(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是________________________________________________________________________________。 【解析】　考查微生物的分离及计数。要分离自生固氮菌，采用选择培养基分离的方法，缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是：配制无氮培养基→灭菌→倒平板→系列稀释→涂布平板→培养→观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照等。 【答案】　(1)酒精灯火焰旁　(2)1～2　(3)3　1 (4)24　菌落数目稳定　因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 (5)30～300　5×107 (6)多于　无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存 【归纳总结】　微生物分离实验中对照实验的设计： ①普通培养基中涂布样品稀释液，证明选择培养基具有选择作用。 ②选择培养基中涂布无菌水，证明选择培养基未被杂菌污染。 随堂即时检测 1．要分离的细菌是能够合成分解尿素的脲酶的细菌，本课题提供的选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2．当样品的稀释度足够高时 ，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30～300的平板进行计数。 课后反思淘金 3．对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。 课前自主学案 课堂互动探究 随堂即时检测 课后反思 淘金 上页 下页 专题二 微生物的培养与应用 课标定位 1.举例说明什么是选择培养基，并研究培养基对微生物的选择作用。 2．设置重复组和对照组，对土壤中分解尿素和纤维素的细菌进行分离和计数。 课前自主学案 一、筛选菌株 选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培养基；选择分解尿素细