基因的表达与调控--真核生物的基因表达调控课件技术 培训.ppt

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基因的表达与调控 ------真核基因表达调控模式;本章所讲述内容: 1、真核生物的基因结构与转录活性; 2、真核基因的转录水平调控; 3、反式作用因子的调控作用; 4、真核基因转录调控的主要模式; 5、其他水平的基因调控; 本节课所讲述内容: 真核生物的基因结构与转录活性: 1、简述真核生物基因表达调控总论; 2、真核基因组的一般构造特点; 3、基因的典型结构及特点; 4、真核生物DNA水平上的基因表达调控; 5、DNA甲基化与基因活性的调控;;真核生物和原核生物由于基本生活方式不同所决定基因表达调控上的巨大差别。 原核生物的调控系统就是要在一个特定的环境中为细胞创造高速生长的条件,或使细胞在受到损伤时,尽快得到修复,所以,原核生物基因表达的开关经常是通过控制转录的起始来调节的。 ? 真核生物(除酵母、藻???和原生动物等单细胞类之外)主要由多细胞组成,每个真核细胞所携带的基因数量及总基因组中蕴藏的遗传信息量都大大高于原核生物。人类细胞单倍体基因组就包含有3×109bp总DNA,约为大肠杆菌总DNA的1000倍,是噬菌体总DNA的10万倍左右!;真核基因表达调控的最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因,从而实现预定的、有序的、不可逆转的分化、发育过程,并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。 ;真核基因组的一般构造特点 ; ⑤ 在真核生物中,基因转录的调节区相对较大,它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对,这些调节区一般通过改变整个所控制基因5‘上游区DNA构型来影响它与RNA聚合酶的结合能力。 在原核生物中,转录的调节区都很小,大都位于启动子上游不远处,调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶与它的结合。 ;⑥ 真核生物的RNA在细胞核中合成,只有经转运穿过核膜,到达细胞质后,才能被翻译成蛋白质,原核生物中不存在这样严格的空间间隔。 ⑦ 许多真核生物的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程(maturation and splicing),才能顺利地翻译成蛋白质。 ;7. 1. 1 基因的典型结构及特点 (1)染色体结构复杂 由DNA、组蛋白、非组蛋白等大分子组成。 其基本结构物质是DNA和组蛋白。 核小体是染色质的基本单位。 真核染色体上三要素: DNA复制起始点、着丝点(centromere)和端粒(telomere)。 目前通用的酵母人工染色体(YAC)以及正在研制的哺乳动物细胞人工染色体(MAC)就是以此为基础, 再加自主复制序列(ARS)、选择标记和插入位点组建的。; (2) DNA顺序重复; (3) 基因不连续性(interrupted gene) ;在真核生物中也有些基因是不含内含子的,如组蛋白基因及α型、β型干扰素基因 、大多数酵母蛋白基因等。 在一个结构基因中,编码某一蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起,而常常被长度不等的内含子所隔离,形成镶嵌排列的断裂方式。所以,真核基因有时被称为断裂基因(interrupted gene)。 目前尚不清楚内含子的生理功能。研究发现,只有真核生物具有切除基因中内含子,产生功能型mRNA和蛋白质的能力,原核生物一般不具有这种本领。 如果要在原核细胞里表达真核基因,必须首先构建切除内含子的重组基因,才有可能得到所研究的蛋白质。 ;; (4) 存在许多基因家族(gene family);简单多基因家族;复杂多基因家族; (5)存在串联重复基因;7.1.3 真核生物DNA水平上的基因表达调控;? 7.1.3.1.“开放”型活性染色质(active chromatin)结构对转录的影响; 存在于“灯刷型”染色体(lamp brush)上的环形结构可能与基因的活性转录有关。“灯刷型”染色体只有在两栖类动物卵细胞发生减数分裂时才能被观察到,它是染色体充分伸展时的一种形态。高倍电镜下观察发现,灯刷型染色体上存在许多突起的“泡”状或“环”状结构,有时还能看到RNP沿着这些突起结构移动,表明这些DNA正在被RNA聚合酶所转录。; 1 . 基因的扩增(amplification) 两栖类和昆虫卵母细胞rRNA基因的扩增非洲爪蟾的染色体上有约450拷贝编码18Sr RNA和28S rRNA的DNA,在卵母细胞中它们的拷贝数扩大了1000倍.一旦卵母细胞成熟,多余的rDNA就没有用了,将被逐渐降解。受精之后,染色体DNA开始复制,并通过有丝分裂的方式,不断扩大细胞群体。在此期间,多余的rDNA继续被降解,直到分裂产生几百个细胞时,rDNA的过剩现象就不复存在了。 ;?7.1.3.3.基因重排; 通过基因

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