大型真菌菌丝体分离、培养及其rDNA ITS分子鉴定研究.pdfVIP

捅 矍 目的：对新疆大型真菌资源进行调查研究，为保护大型真菌的多样性和人工栽培 提供理论基础。 方法：索新疆局部地区大型真菌的物种多样性，对部分大型真菌特别是野生食用 菌进行组织培养、分离菌丝体，并对菌丝体的固体和液体培养配方进行了优化； 从形态学特征上把大型真菌进行了分类，并对其经济价值进行了评估；结合形态 学观察，利用rDNAITS区段的DNA序列对子实体和分离得到的菌丝体进行物 种鉴定；最后对菌丝体进行了栽培初探。 结果： 得的菌丝是纯菌丝。 2、对乌鲁木齐和哈密的羊肚菌资源进行了调查，最终从形体上挑选了4个 羊肚菌子实体(其中1个来自乌鲁木齐南山，3个来自哈密巴里坤)，同时从四 川绵阳某研究所购得一株高羊肚菌菌种做为实验对照。经测序的ITS分析可知从 形体上挑选的3个哈密羊肚菌子实体序列相同，长度为734bp。乌鲁木齐南山羊 肚菌子实体ITS序列长度为738bp；从四川绵阳某研究所购得的羊肚菌菌丝ITS 长度为737bp。 3、对哈密巴里坤军马场地区的大型真菌进行了资源调查，获得了91种形态 株，根据形态学特征初步鉴定出了37株，组织培养得到26株菌丝。有55个子 实体和22个菌丝的测序信号较好，分子鉴定证明9株菌丝为纯菌丝。出菇实验没 有获得预期效果。 结论： 1、结合形态学特征以双胞蘑菇O蛆)为对照，以野蘑菇(Agaricusarvensis)为 外类群利用NJ法构建的亲缘关系树显示博乐蘑菇归属为双环蘑菇(Agaricus bitorquis)较为合理。 2、以形态学特征、地理分布规律和BLAST分析结果，以圆锥钟菌(Verpa conica)为外类群，选取羊肚菌(Morchella crassipes)，黑脉(小顶)羊肚菌(Morchella conica)，高羊肚菌(Morchellaelata)，肋脉羊肚菌(Morchellacostata)6个品种构建 costata 系统进化树显示哈密巴里坤羊肚菌和乌鲁木齐南山羊肚菌属于Morchella 类群。证明哈密和乌鲁木齐羊肚菌形态学上的差异是由于环境或发育不同阶段的 差异造成的。 3、部分形态株给出了具体命名，尚不能确定的给出属名或暂命名为 Uncultured fungus。 关键词：大型真菌；菌丝体；rDNAITS；分子鉴定 Abstract Researchthe resourcesin to the of Object： Macrofungi Xinjiangprotectdiversity and atheoreticalbasisforartificialcultivation． macrofungiprovide Methods：We the of in preliminarilyexploreddiversitymacrofungispeciespart areasof andculturedsome thewildedible Xinjiangprovince fungi，especially fungi and toisolatethe thesame thesolid medium． time，we mycelium．At optimized liquid DNA Wcclassifiedthe andassessedtheeconomicvalue．Weusedthe ma