真核生物基因表达的调控--真核生物基因表达的调控一重点培训.ppt

基因的表达与调控 真核生物基因表达的调控;; ? 真核生物基因调控,根据其性质可分为两大类: 第一类是瞬时调控或称可逆性调控,它相当于原核细胞对环境条件变化所做出的反应,包括某种底物或激素水平升降及细胞周期不同阶段中酶活性和浓度的调节。? 第二类是发育调控或称不可逆调控,是真核基因调控的精髓部分,它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。; ? DNA水平调控(DNA regulation); 转录水平调控(transcriptional regulation); 转录后水平调控(post transcriptional regulation); 翻译水平调控(translational regulation); 蛋白质加工水平的调控(regulation of protein maturation)等。 ;8;◆基因表达以正调控为主 ◆转录与翻译在不同的区域进行 ◆无操纵子和衰减子 ◆个体发育复杂 ◆受环境影响较小;1、基因家族(gene family);1)简单基因家族;12;2)复杂基因家族;3)发育相关复杂基因家族;15;16;4)假基因(Pseudogene);18; 果蝇的sex－lethal基因转移到小鼠体内,大多数小鼠表现正常,但有一个品系的小鼠在幼年期全部死亡。研究发现,sex－lethal基因插入到makorin1－p1假基因中部,破坏了该假基因的转录。如果将假基因makorin1－p1敲除,makorin1基因将被关闭。;2、DNA水平调控;21;22;▲DNase的敏感性和基因表达 含有转录活性基因的染色质区域对DNaseⅠ降解的敏感性要比无转录活性区域高得多(超敏感位点)。这是由于此区域染色质的DNA蛋白质结构变得松散,DNaseⅠ易于接触到DNA之故。;24;鸡胚红细胞;▲核基质结合区( matrix attachment region ,MAR) MAR一般位于DNA放射环或活性转录基因的两端。在外源基因两端接上MAR,可增加基因表达水平倍以10上,说明MAR在基因表达调控中有作用。是一种新的基因调控元件。;27;B 组蛋白的变化;29;C 端粒位置效应(telomere position effect ,TPE) 端粒处核小体的堆积紧密,导致该处附近的基因不表达;基因在染色体的位置不同,表达的效果也不同。;31;2) DNA的甲基化与去甲基化 A 甲基化 ◆ DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一,可能存在于所有高等生物中,DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化诱导了基因的重新活化和表达 ◆ DNA甲基化的主???形式:CpG、CpXpG、CCA/TGG和GATC;33;▲ CG islands 高等真核生物中包含未甲基化CpG双核甘酸序列通常成串出现在随时准备好转录或转译的脱氧核糖核酸中,这段序列称为CG岛。;35; ▲ 甲基化酶 ①日常型(mainteance) ②从头合成型( denovo synthesis) ;▲ 在一些不表达的基因中,启动区的甲基化程度 很高,而处于活化状态的基因则甲基化程度较 低. ▲ 去甲基化又可使基因恢复活性。;B DNA甲基化抑制基因转录的机制 甲基化抑制基因转录的直接机制;甲基化抑制转录的间接机制 ;40;甲基化提高了突变频率 ;C DNA甲基化与X染色体失活 ? X染色体失活中心(X-chromosome inactivation center,Xic):X染色体上存在一个与X染色体失活有密切联系的核心部位,定位在Xq13区。 ? Xi-specific transcript (Xist)基因:只在失活的X染色体上表达,产物是一功能性RNA,没有ORF却含有大量的终止密码子。 Xist RNA分子可能与Xic位点相互作用,引起后者构象变化,易于结合各种蛋白因子,最终导致X染色体失活。;43;;▲ 遗传印迹(genetic imprinting) 或亲本印迹 (parental imprinting):是指一对等位基因由于来源不同(父源或母源)而有不同表现(表达或不表达活性),使个体出现不同性状的遗传现象。 如源于父本的IGF-Ⅱ (胰岛素样生长因子Ⅱ)基因 可表达,而源于母本的则不能表达。 选择性甲基化 ;46; 在生殖细胞形成或胚胎发育过程中DNA的甲基化修饰是引起父源和母源基因活性差异的关键。 高度甲基