2014年研究生实验6聚丙烯酰胺电泳层析.ppt

Gly - Pro - Cl- Gly - Pro - Cl- Cl- Cl- Cl- Pro - Pro - Pro - Gly - Gly - Gly - pH为8.9的电泳缓冲液（Tris-Gly） pH为6.7的浓缩胶 pH为8.3的分离胶 有效泳动率： MCl- M Pro- M Gly- 6%胶 3%胶 四、实验结果的分析 ? 相关理论 表-1 血清中各蛋白质的相关特性 种 类 分子量(万） PI 分 布(%) 清蛋白 ?1-球蛋白 ?2-球蛋白 ?-球蛋白 ?-球蛋白 6.9 5.0 9.0 13.0 11.0 6.1 7.3 6.8 7.6 8.0 55 2.1~30.8 4.1~72.5 1.2~25 15.6 前清蛋白 清蛋白 ?2-球蛋白 ?1-球蛋白 ?-球蛋白 ?-球蛋白 * * * * * * * * * * * * * * * * * * 缓冲液离子成分、PH的不连续性：电极缓冲液通常为pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液，样品及凝胶中缓冲液为pH6.7 Tris-HCL缓冲液。电极缓冲液的pH=8.3，甘氨酸的电离小，有效迁移率小，称为慢离子；浓缩胶中的氯离子完全电离，有效迁移率大，称为快离子；蛋白质在浓缩胶中介于二者之间。电泳开始后，氯离子跑得最快，留下一段低电导区，产生高电位梯度（电位与电导率成反比），使甘氨酸离子