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人血清中白蛋白与球蛋白的分离.PDFVIP

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人血清中白蛋白与球蛋白的分离

Marketing  天美(中国)科学仪器有限公司 TECHCOMP (CHINA) LTD. 中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层 TEL:010 FAX:010 E-MAIL:techcomp@   人血清中白蛋白与球蛋白的分离   随着超速离心机转速的提高,用超速角式转头分离人血清中白蛋白与球蛋白的离心时间越来越 短,用5—20%线性蔗糖梯度作蛋白质速率—区带(Rate—zonal)分离,样品以近等速沉降,低 于分析实验结果。下面的简单分离实例有代表性。 设备:离心机:智能型超速离心机(HitachiCP—WX系列) 转头:定角:P90AT,P80AT,比较实验转头:P40ST P90AT:90,000rpm,700,000xg,8×12mlK=25 P80AT:80,000rpm,615,000xg,8×12mlK=27 P40ST:40,000rpm,284,000xg,6×13mlK=139 离心管:12ml及13mlPA管  CP-WX系列超速离心机  样品:标准人血清1ml(2.5mg/ml),用0.15MNaCl溶解。 Marketing  天美(中国)科学仪器有限公司 TECHCOMP (CHINA) LTD. 中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层 TEL:010 FAX:010 E-MAIL:techcomp@ 梯度液:5—20%线性蔗糖梯度,P90AT及P80AT梯度液量约9.5ml,P40ST梯度液量约9.6ml。 方法:5—20%蔗糖梯度液上铺约1ml人血清,对P90AT及P80AT必须装满(用血清调节),P40ST 加样至距管口3mm。 离心参数: P90AT:90,000rpm,2小时,2.5小时,3小时,5℃,加速“5”减速“5” P80AT:80,000rpm,2小时,2.5小时,3小时,5℃,加速“5”减速“5” P40ST:40,000rpm,14小时,16小时,18小时,5℃,加速“8”减速“8” 曲线绘制:用日立DGF—U梯度仪通过上口连续取样至带流动池分光光度计连续测O.D.(280nm) 后收集。   结果及分析:  转头 白蛋白峰顶距离从管口算起的容量(ml) 球蛋白峰顶距离从管口算起的容量(ml) 2小时 2.5小时 3小时 2小时 2.5小时 3小时 P90AT 4.5 5.7 6.8 6.2 7.9 9 P80AT 4.3 5.5 6.6 6 7.6 8.7 14小时 16小时 18小时 14小时 16小时 18小时 P40ST 3.6 4.1 4.7 5.0 5.8 6.6    

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