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人血清中白蛋白与球蛋白的分离
Marketing
天美(中国)科学仪器有限公司
TECHCOMP (CHINA) LTD.
中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层
TEL:010
FAX:010
E-MAIL:techcomp@
人血清中白蛋白与球蛋白的分离
随着超速离心机转速的提高,用超速角式转头分离人血清中白蛋白与球蛋白的离心时间越来越
短,用5—20%线性蔗糖梯度作蛋白质速率—区带(Rate—zonal)分离,样品以近等速沉降,低
于分析实验结果。下面的简单分离实例有代表性。
设备:离心机:智能型超速离心机(HitachiCP—WX系列)
转头:定角:P90AT,P80AT,比较实验转头:P40ST
P90AT:90,000rpm,700,000xg,8×12mlK=25
P80AT:80,000rpm,615,000xg,8×12mlK=27
P40ST:40,000rpm,284,000xg,6×13mlK=139
离心管:12ml及13mlPA管
CP-WX系列超速离心机
样品:标准人血清1ml(2.5mg/ml),用0.15MNaCl溶解。
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天美(中国)科学仪器有限公司
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中国北京朝阳区天畅园7 号楼1、3层
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梯度液:5—20%线性蔗糖梯度,P90AT及P80AT梯度液量约9.5ml,P40ST梯度液量约9.6ml。
方法:5—20%蔗糖梯度液上铺约1ml人血清,对P90AT及P80AT必须装满(用血清调节),P40ST
加样至距管口3mm。
离心参数:
P90AT:90,000rpm,2小时,2.5小时,3小时,5℃,加速“5”减速“5”
P80AT:80,000rpm,2小时,2.5小时,3小时,5℃,加速“5”减速“5”
P40ST:40,000rpm,14小时,16小时,18小时,5℃,加速“8”减速“8”
曲线绘制:用日立DGF—U梯度仪通过上口连续取样至带流动池分光光度计连续测O.D.(280nm)
后收集。
结果及分析:
转头 白蛋白峰顶距离从管口算起的容量(ml) 球蛋白峰顶距离从管口算起的容量(ml)
2小时 2.5小时 3小时 2小时 2.5小时 3小时
P90AT
4.5 5.7 6.8 6.2 7.9 9
P80AT 4.3 5.5 6.6 6 7.6 8.7
14小时 16小时 18小时 14小时 16小时 18小时
P40ST
3.6 4.1 4.7 5.0 5.8 6.6
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