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第三章 分子荧光分析法Chapter 3 Molecular Fluorescence;2008年诺贝尔化学奖 ;; 某些物质被一定波长的光照射时，会在一定时间内发射出波长比入射光长的光，如果这个时间比较短，这种光就称为荧光。荧光由一种能发荧光的矿物 ?? 萤石(fluospar)而得名。 我们这里要介绍的荧光，是指物质在吸收紫外光和可见光后发出的波长较长的紫外荧光或可见荧光。 除了紫外光和可见光可能激发荧光外，其它的光如红外光、X射线也可能激发出荧光，因此除紫外荧光或可见荧光外，还有红外荧光、X射线荧光等。;用荧光抗体染色之原生动物;K. Brejc et.al., PNAS 94 (1997) 2306;概述;一、分子荧光的产生-光致激发;S2;分子中基态电子激发后失活的可能方式;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;1. 分子荧光产生的必备条件;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;第一节 基本原理;问题讨论;第二节 荧光光谱仪;第二节 荧光光谱仪;二、荧光光谱仪的主要部件;第三节 分子荧光分析法应用;第三节 分子荧光分析法应用;第三节 分子荧光分析法应用;第三节 分子荧光分析法应用;分子荧光法课堂练习;问题讨论;一、什么是分子荧光法？88 1. 什么是分子荧光法？什么是分子荧光？ 二、什么物质可以用分子荧光法测定？88-93 2. 分子荧光或磷光是如何产生的？ 3. 何为振动驰豫、内转换、外转换、系间跨越、荧光发射、磷光发射？ 4. 什么是荧光激发光谱？什么是荧光发射光谱？各有何特点和作用？ 5. 为什么荧光发射光谱与激发光波长无关？ 6. 何谓Stokes位移？Stokes位移是如何产生的？何为镜像规则？ 7. 分子产生荧光的必备条件是什么？ 8. 什么是荧光量子产率？什么样结构的化合物荧光量子产率高？ 三、分子荧光法定量关系式如何？93-95 9. 荧光强度与样品浓度间关系如何？该关系式成立的条件是什么？ 10. 影响溶液荧光强度的因素有哪些？如何影响？何为荧光猝灭？ 四、分子荧光法是如何测量的？95-96 11. 分子荧光光谱仪部分功能如何？与UV-Vis有何不同？ 12. 分子荧光光谱仪的激发和发射光路为何设计呈直角？ 13. 分子荧光分析法有何特点？ 五、分子荧光法是如何进行定性定量分析的？97-99 14. 分子荧光分析法有哪些主要定量方法？如何操作和计算？