第八章能量代谢与生物能的利用张洪渊.ppt

（3）苹果酸穿梭作用 细胞液中代谢物氧化产生的NADH还可通过苹果酸穿梭作用进入线粒体和呼吸链，产生3分子ATP。 四、氧化磷酸化的解偶联作用和抑制作用 1、呼吸毒物---阻断电子传递 抑制呼吸链传递氢和传递电子，使氧化作用受阻，自由能释放量减少，ATP不能生成。 2、解偶联剂---阻碍呼吸链释放的能量用于ATP合成 氧化作用与磷酸化作用相偶联，是一切需氧生物体内两种不同的生物化学反应相互依赖、相互联系的运动方式。磷酸化作用所需能量由氧化作用提供，氧化作用所产生的能量通过磷酸化作用储存。 解偶联作用：凡是能破坏氧化与磷酸化相偶联的作用。 解偶联剂不抑制电子传递过程，能携带质子穿过线粒体内膜，破坏内膜两侧的氢离子梯度，抑制呼吸链过程中的磷酸化作用，使ATP不能生成。 第四节 生物能的利用 活的生物需要连续不断地输入自由能，其用途有三：肌肉收缩和其他细胞运动中做功。二是分子和离子的主动转运；三是由简单的小分子合成复杂的大分子和衍生出其他生物分子。 一、ATP是生物体系中自由能的通用货币 1、能量储存---机体内以磷酸肌酸和磷酸精氨酸储存能量 ATP在体内过剩时，脊椎动物肌肉和神经组织中作为储存能量的物质 ATP在体内过剩时，无脊椎动物作为储存能量的物质 2、能量转换---ATP是产能与需能反应中能量的转换物质 （1）ATP末端磷酸基转移给葡萄糖 二、体内能量代谢的调节 1、能荷---腺苷酸库中可供利用能量的量度 能荷：是指细胞内ATP-ADP-AMP 系统中可供利用的高能磷酸键的量度。 2、能量平衡---ATP/ADP比值的调节作用 第五节 高能化合物的制备技术 一、ATP的制备技术 1、ATP的应用 三磷酸腺苷（ATP）是一种重要的生化能量试剂和临床核苷酸类药物，在医疗领域被广泛用作细胞激活剂，对肌肉萎缩，肝炎、癌症、冠状动脉硬化等疾病有治疗作用。 2、ATP的提取法 以前兔肌提取法，采用汞盐沉淀工艺，提取液先形成ATP钡盐，再转化成ATP汞盐，除汞后转化成ATP二钠盐沉淀，干燥后得成品。 3、ATP的合成法 利用酵母以葡萄糖作为能量供体的磷酸化前体（如腺苷和AMP）法 利用克隆有6-磷酸果糖激酶和磷酸丙糖异构酶基因的大肠杆菌磷酸化的AMP法 利用产氨短杆菌分段合成及磷酸化将腺嘌呤直接核苷酸化法。 （1）发酵法 只利用产氨短杆菌，培养20-24h的菌种以7%-9%的接种量接入发酵罐，然后加入腺嘌呤，再控制pH在6.8-7.2 将酵母菌与产氨短杆菌混合培养产ATP效率提高 （2）酶法 包括从微生物细胞中提取酶合成ATP，用游离微生物细胞外的酶合成ATP；由固定化微生物生产ATP。酵母厌氧发酵中产生一系列的胞外酶，其中某些酶能使腺嘌呤和腺苷酸转化成ATP。 4、ATP的检测方法 采用琼脂糖平板电泳法、DEAE-纤维素薄板色谱法、纸色谱法。 二、磷酸肌酸的制备技术 1、磷酸肌酸（CP）的生理作用 对能量物质ATP起到缓冲作用，在大量消耗ATP时来由CP补充 具有药理作用，是一种重要的心肌保护剂，神经保护、皮肤保护、延缓衰老等，在心肌梗塞、心衰竭的治疗。 2、磷酸肌酸的制备方法 生物提取法、化学合成法、酶催化法 化学合成：将一水肌酸由三氯氧磷对其进行磷酰化，生成的磷酸肌酸以钡盐的形式与氯化钠分离，然后把钡盐转化成钠盐，并在乙醇—水体系中结晶析出。 3、磷酸肌酸的检测方法 多采用UV法-特异性联合酶测定法，反应原理： NADH转化为NAD时导致340nm处吸光度下降，此方法为CP的特异性方法 第八章 能量代谢与生物能的利用（重点） 1、呼吸链 2、氧化磷酸化 3、 P/O 4、底物水平磷酸化 5、解偶联剂作用的原理？ 第八章 能量代谢与生物能的利用 生物氧化：是在生物体内的氧化还原作用。 讨论（1）细胞如何利用氧气将代谢物分子中的氢氧化成水；（2）代谢物中的碳如何在酶催化下生成CO2；（3）有机物被氧化时产生的自由基如何被收集、转换或储存。 一、生物氧化的方式与特点 1、脱氢---生物氧化的主要方式 失电子 加氧 脱氢 2、脱羧---CO2的生成机制 (1)α-直接脱羧 如丙酮酸脱羧形成乙醛 3、耗氧—水的生成机制 代谢物被各种脱氢酶催化脱氢，脱下的氢再经过一系列传递体的传递，最后与氧结合生成水。 4、特点—加水脱氢，缓慢放能 生物氧化与体外燃烧在本质上的不同 二、参与生物氧化的酶类 1、脱氢酶—催化呼吸底物的氧化 脱氢酶：能使代谢物的氢活化、脱落并将其传递给受氢体或中间传递体的一类酶为脱氢酶，脱氢酶分为两类： 以黄素核苷酸为辅基的脱氢酶 包括黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 以烟酰胺核苷酸为辅酶的脱氢酶 此类酶以NAD（CoI)或NADP（CoII）为辅酶，催化代谢物脱下的氢由NAD