乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC-MS分析.docVIP

乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC-MS分析 第3l卷第2期 2007年4月 南昌大学(理科版) JournalofNanchangUniversity(NaturalScience) Vo1.3lNo.2 Apr.2007 文章编号:1006～0464(2007)02—0150—04 乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC—MS分析 王维亚,田颖刚,谢明勇,吴红静,唐永富 (南昌大学食品科学教育部重点实验室,江西南昌330047) 摘要:用氯仿:甲醇(2:1)超声提取乌骨鸡总磷脂,丙酮脱油精制后,经皂化,甲酯化处理,应用Gc—Ms联用技 术对其侧链脂肪酸组成进行分析,并以面积归一法,计算各脂肪酸的相对百分含量.结果显示,乌骨鸡总磷脂中含 有硬脂酸27.46%,花生四烯酸21.39%,油酸18.22%,亚油酸16.67%,棕榈酸12.13%,二十二碳六烯酸(DHA) 2.26%,二十碳三烯酸1.71%,棕榈油酸0.16%.不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量分别为6o.41%和42. 03%.乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸中高比例的多不饱和脂肪酸和花生四烯酸含量是乌骨鸡磷脂的显着特征. 关键词:乌骨鸡;磷脂;脂肪酸;气相色谱一质谱 中图分类号:TS201.2文献标识码:A 乌骨鸡(Gallusgallusdomesticusbrisson)是我国 特有的药用保健鸡种,主产于江西省泰和县.乌骨 鸡药用历史已有千余年,传统中医理论认为乌骨鸡 能补肝肾,益气血,强筋骨,续绝伤;活血,调经,止 崩带,治妇女百病.现代研究表明乌骨鸡含有丰富. 的蛋白质,脂肪,胡萝卜素,乌骨鸡黑素等营养成 分J.磷脂是脂肪的重要组成部分,具有抗衰老, 防动脉粥样硬化,调节血糖,神经调节及智力开发等 生理功能.作为膜的结构和功能单位,磷脂以其规 律的结构维持细胞的正常形态,同时也是膜上的各 种脂类依赖性酶起催化作用时不可缺少的物质基 础.磷脂含量和结构的改变将引起有关酶活性,受 体功能和膜通透性的变化J,进而影响机体的代谢 和功能.磷脂的脂肪酸组成影响着膜的结构和功 能HJ,尤其是多不饱和脂肪酸(PUFAs)对于维持 膜上酶的正常活性,膜的流动性和渗透性起着重要 的作用.研究表明膳食中补充n一3系列脂肪酸能 改变红细胞膜的结构,从而增加血红细胞的变形能 力. 目前关于乌骨鸡磷脂类成分分析鲜有文献报 道.气一质联用技术既有气相色谱高分离效能,又 能对不明化合物进行准确快速的质谱定性,定量分 析卜引,是测定乌骨鸡总磷脂侧链脂肪酸组成的适 宜方法.本文脂肪酸甲酯化处理中以三氟化硼为催 化剂,提高了甲酯化效率,缩短了反应时问,共分离 和鉴定了8种脂肪酸,测出多不饱和脂肪酸占总脂 肪酸的含量为42.03%,该实验结果为研究乌骨鸡 磷脂的补益,药用功能提供了一定的理论参考价值. 1材料与方法 1.1材料与试剂 乌骨鸡(Gallusgallusdomesticusbrisson),75— 90d日龄,雌雄各半,由深圳生物谷集团江西泰和 乌鸡原种鸡场提供;氯仿,甲醇,丙酮,正己烷,氢氧 化钾,三氟化硼,氯化钠等均为分析纯;Folch溶剂: 氯仿一甲醇(2:1);氮气,高纯氦气(龙口华东气体 有限公司). 1.2仪器 美国Agilent6890型气相色谱与5973型质谱联 用仪(美国Agilent公司);KQ一50超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司);AnkeTGL一16C离心 机(上海安亭科学仪器厂);FJ一200高速分散均质 机(上海标本模型厂);DS一1高速组织捣碎机(上 海标本模型厂);旋转蒸发仪RE一52(上海亚荣生 化仪器厂). 1.3实验方法 1.3.1乌骨鸡磷脂的提取与精制取泰和乌骨鸡 200只,宰杀,去毛,内脏,洗净,割取鸡肉,用绞肉机 绞成肉泥,反复两次搅拌均匀.从大量肉泥的不同 部位取样,混合均匀,用组织捣碎机捣碎.称取约 100g肉泥加入2倍的Folch溶剂高速匀浆后,超声 提取30min(频率:40kHz,功率:50w),离心收集 收稿日期:2006—09—10 基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0540),江西省农业科技重点攻关资助项目(2005);南昌大 学测试基金资助项目(2005029) ....作者简介:王维亚(1982一),女,硕士生,通讯作者:谢明勇(1957一),男,博士,教授,博士生导师,E—mail:myxie@ncu. edu.crl 第2期王维亚等:乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC—MS分析 提取液;残渣加2倍的Folch溶剂超声提取二次,每 次30min,温度控制在25℃以下.合并滤液,用无 水Na:SO脱水,氮气保护下回收溶剂,得乌骨鸡总 脂质提取物.将总脂质提取物逐滴加入到不断搅拌 的冷丙酮中,析出沉淀后离心,得不溶物即乌骨鸡磷