HaNPV多角体蛋白在宿主不同组织中的时相性表达.docVIP

HaNPV多角体蛋白在宿主不同组织中的时相性表达 zL,;～7 应用与环境生暂1999,5(2):203—2o7 C.,.押f.Blr.B.1999-04-25 HaNPV多角体蛋白在宿主不同 组织中的时相性表达 / 旦U蔡秀玉 (中国科学瞎动暂研究所北京t00~0) * 摘要应用亲朝爱脏过穗层析对多角体蛋白多克睦抗血清进行纯化,薰程过氧化暂尊进行标记,用于ELISA 法检樱I中脑,血{I}巴,脂时体中的多角体蛋白的吉量变化结果:中脑在摩染24b吉量最高.48b量低.72h较48 h略有升高.96h和120h与72b基车保持一致:血{I}巴在感染48b古量量^,然后下降至96h.120b卫横有升 高:唐肪体在感染72h开始增加.直至120b.三种组织中多角.}I蛋白古量变化并不同步占L寰选的时相性着.与 N的感染对程基奉一致.睁中脑至血砬再翻脂肪排免疫电幢麓寨表明,感染72b的中脑.在胞浆中音威的 多角体蛋白此时已转运强鲴睢柱中 美t谰檀塑多角体病毒(N吖);多角体蛋白 中蛋涪分粪号O∞943 -.- .一 09653 中脑;血淋巴;唐肪体j咏 TIMECOUIE0FHaNPVPOLYHEDRINEXP]匿ESS10N INDⅡ重RENT.r1SSUESoFHoST SUNGuozLIrl,DINGCuiamp;CAIXiuyu (n帆知撕y,k搿eAmdemyamp;.BeijinBIO(3080) AhstractThePol如,-i血a丑岫6edbyinilyclmmmtognq~y帅usedinF_JJSAb monitorthedevelopmenlofpolyhedrln.IlwasdemonsU~ed岫inthemldgutthep血c∞mm estimatedtObethe岫嘲at24h如№NPvinoeu~n,theat48handre=a~.1at^出 levelat72,96end120h;thepolyp.~enlxatiollinlhe1.emoIy砒n.dthehi炯levelat48h妇 i丑0c,thende曲96handinoreased~Iightiyat120h;theineree~ebeganat72h 如血∞andoonth~ledtOinexea~岫棚120ha8found.mthefatb0dy.pB∞曲,the uIIyIIc.咐cha日髑ofP0n~~enh-afoainthethree鲫l祷tested咖oons~tentwiththeIm~ees NPVinfection:thevlrolns州Leclinthenucleithemid蛐cells,thenenteredintothehea~oood曲帆 besementmt*.andfimtliyinfectedthefatbody.Immtmoeleemmmi口∞pIu如iBc咖dthateoId c1懵w帅.bseIvedbo山inthe哪.山帅themmleus吐72hafter帆,-gEe咄t polyhedrinBylI【h雹巴dinthecyto~beIra~itedtOthe硼ld叫. KeywnrdspolyIIedrla;exlaession;mldgul;hemolymph;f~dy;删dear—ed曲iB(NP) 用EusA涪检畏I杆状病毒抗原,前人世过许多工作,怛检测样品多局限于病虫的血淋巴或病虫的匀浆渍 在生态学和流行病学研究中,这样的检测无疑是实用,快速的.怛过毕竟不能真实地反腱出抗厚在虫体各组织● 中的表达情况.了解一次感染组织,病毒粒子复翩的主要场所——中肠细胞和二次感组织,多角体形成的主 要场所——脂肪体细胞中病毒抗原物质的表选.对于理解病毒在虫体内的复制,增殖,体内播散途径等.是有 裨益的.本文的目的是用}hNPV多角体蛋白抗体检测其抗原在中肠,血淋巴和赭肪体中的含量变化,以了解 收稿日期:1998-04-27接受日期:1998,-06?18 九五攻关礓日(96一∞5—0l一09一∞)部分费曲及农业生害置害综台皓理国采重点实齄宣簧助 . t 应用与环境生物5卷 HaNPV在宿主体内的感染复制情况 I材料与方法 1.1材料 1I.I虫种棉斡虫由中国科学院动物研究所昆虫生态宣吴坤君研究员提供.均为室内人工饲科饲养传 代.饲养温度(0)为26℃±J℃.? 1I.2HaRTVHaNPv为本实验室分离提供.饲养的棉斡虫中挑选虫赞一致的健康个体,用配成一定浓 度的HaNPv悬液感染幼虫增殖病毒.收集感染病毒而死的幼虫怡|成匀浆,3层纱布过滤.滤灌经差速离心,蔗 糖密度梯度离心(p=450g.L-.一600gL..),纯化的多角体经冷冻干燥,于口一20℃保存备用. 1.2方法 J.2.I多体量白的分