试验三活化部分凝血活酶时间测定.pptVIP

实验三 活化部分凝血活酶时间测定 一、试管法 【目的】　掌握活化部分凝血活酶时间(APTT) 测定的试管法。 【原理】 APPT是在体外满足内源性凝血全部条件后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下，以白陶土（激活剂）激活因子Ⅻ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，再加入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。 【操作】 1．分离乏血小板血浆 2．平衡温度 3．温浴氯化钙溶液 4．测定正常人参比血浆的APTT 5．测定待检血浆的APTT 6．报告方式 【注意事项】 1．试剂质量对APTT测定结果影响很大，不同的部分凝血活酶试剂,其质量也不同。一般选用对因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ在血浆浓度为200～250U/L时灵敏的试剂。激活剂因规格不一，其致活能力不同，因此参比值有差异。如果正常人参比血浆APTT明显延长，则提示APTT试剂质量不佳。 2．采血后应尽快检测，最迟不应超过2h。被检血浆放置过久，凝固时间有缩短的倾向。 3 ．血浆加APTT试剂后的温浴时间不得少于3min 。时间过短，APTT延长。 4．其它同血浆凝血酶原时间测定。 二、血凝仪法 【目的】 掌握活化部分凝血活酶时间的血凝仪测定法。 【原理】 APPT 是在体外满足内源性凝血全部条件后的血浆凝固所需的时间。在37℃条件下，以白陶土（激活剂）激活因子Ⅻ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面，再加入适量的Ca2+即可满足内源性凝血的全部条件。测定从加入Ca2+到血浆凝固所需的时间即为APTT。 【操作】 1．分离乏血小板血浆 同试管法。 2．平衡温度 同试管法。 3．温浴氯化钙溶液 同试管法。 4 ．测定正常人参比血浆的APTT。 5．测定待测血浆的APTT。 6．报告方式 同试管法。 【注意事项】　同试管法。 * *