第4章 紫外可见分光光度法经典案例.pptVIP

4．吸光度测量的条件选择： 1）测量波长的选择：λmax 2）吸光度读数范围的选择： 3）参比溶液(空白溶液)的选择： 选A=0.2~0.8 注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和 界面反射等因素对透光率的干扰 三、偏离Beer定律的因素 依据Beer定律，A与C关系应为 经过原点的直线 偏离Beer定律的主要因素表现为 以下两个方面 （一）光学因素 （二）化学因素 （一）光学因素 非单色光的影响： Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光 照射物质的光经单色器分光后 并非真正单色光 其波长宽度由入射狭缝的宽度 和棱镜或光栅的分辨率决定 为了保证透过光对检测器的响 应，必须保证一定的狭缝宽度 这就使分离出来的光具一定的 谱带宽度 （二）化学因素 Beer定律适用的另一个前提：稀溶液 浓度过高会使C与A关系偏离定律 第四节 紫外分光光度计 1．光源： 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 棱镜——对不同波长的光折射率不同 色散元件 分出光波长不等距 光栅——衍射和干涉 分出光波长等距 钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 3．吸收池： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 5．记录装置：讯号处理和显示系统 光电池 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器 类型： 1．单光束分光光度计： 特点： 使用时来回拉动吸收池 →移动误差 对光源要求高 比色池配对 2．双光束分光光度计： 特点： 不用拉动吸收池，可以减小移动误差 对光源要求不高 可以自动扫描吸收光谱 3．双波长分光光度计 特点： 利用吸光度差值定量 消除干扰和吸收池不匹配引起的误差 第五节 定性和定量分析 一、结构分析 二、定性分析 三、定量分析 紫外－可见分光光度法可以进行化合物某些基团的判别、共轭体系及构型、构象的判断。 一、结构分析 1. 某些特征基团的判别 有机物的不少基团(生色团)，如羰基、苯环、硝基、共轭体系等，都有其特征的紫外或可见吸收带，紫外－可见分光光度法在判别这些基团时，有时是十分有用的。 如在270～300nm处有弱的吸收带，且随溶剂极性增大而发生蓝移，就是羰基n－π*跃迁所产生R吸收带的有力证据。在184nm附近有强吸收带(E1带)，在204nm附近有中强吸收带(E2带)，在260nm附近有弱吸收带且有精细结构(B带)，是苯环的特征吸收，等等。可以从有关资料中查找某些基团的特征吸收带。 2. 共轭体系的判断 共轭体系会产生很强的K吸收带，通过绘制吸收光谱，可以判断化合物是否存在共轭体系或共轭的程度。 如果一化合物在210nm以上无强吸收带，可以认定该化合物不存在共轭体系；若在215～250nm区域有强吸收带，则该化合物可能有两至三个双键的共轭体系。 如1－3丁二烯， 为217nm， 为21,000；若260～350nm区域有很强的吸收带，则可能有三至五个双键的共轭体系，如癸五烯有五个共轭双键， 为335nm， 为118,000。 3. 异构体的判断 包括顺反异构及互变异构两种情况的判断 A. 顺反异构体的判断 生色团和助色团处在同一平面上时，才产生最大的共轭效应。 由于反式异构体的空间位阻效应小，分子的平面性较好，共轭效应 强，因此， 及 都大于顺式异构体。例如，肉桂酸顺、反式 的吸收如下： 顺式 ＝280nm， ???=13500 反式 ＝295nm， ????=27000 B.互变异构体的判断 某些有机化合物在溶液中可能有两种以上的互变异构体处于动态平 衡中，这种异构体的互变过程常伴随有双键的移动及共轭体系的变化， 因此也产生吸收光谱的变化。最常见的是某些含氧化合物的酮式与烯醇 式异构体之间的互变。例如乙酰乙酸乙酯就是酮式和烯醇式两种互变异 构体： 它们的吸收特性不同：酮式异构体在近紫外光区的 为272nm( 为16)，是n－π*跃迁所产生R吸收带。烯醇式异构体的 为243nm( 为16000)，是π－π*跃迁共轭体系的K吸收带。