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甘露醇及犃犵荦犗3对根癌农杆菌介导的多年生黑麦草遗传转化的影响

草 业 学 报 第 卷 第 期 102-110 20 1                 年 月 , 2011 2 ACTAPRATACULTURAESINICA Vol.20No.1         甘露醇及犃犖犗3对根癌农杆菌介导的 犵 多年生黑麦草遗传转化的影响 , , 12 12 1 1 乔定君 ,毛萍 ,马欣荣 ,杨宏 ( 中国科学院成都生物研究所生态恢复重点实验室,四川 成都 ; 中国科学院研究生院,北京 ) 1. 6100412. 100049 摘要:多年生黑麦草是优良的牧草和草坪草。农杆菌介导多年生黑麦草遗传转化非常困难。为了建立稳定的多年 生黑麦草遗传转化体系,本研究以品种“多福”种子成熟胚为外植体诱导愈伤组织,携质粒 pCAMBIA2301的根癌 农杆菌 介导,进行遗传转化。在预培养及共培养基中添加 / 甘露醇或 / 硝酸银,并分析了 EHA105 0.1molL 5m L g 二者对转化的影响。经巴龙霉素筛选、 及 组织染色检测表明,共获得了转基因植株 株。添加 PCR GUS 38 0.1 / 甘露醇或 / 或 / 甘露醇 / ,转化效率分别为对照的 , 和 molL 5m LA NO 0.1molL +5m LA NO 1.961.59 2.95 g g 3 g g 3 倍。结果表明,在根癌农杆菌介导的多年生黑麦草愈伤组织遗传转化中,在预培养和共培养基中添加甘露醇或 A NO 能提高转化率,且当二者共同添加时可显著提高。 g 3 关键词:多年生黑麦草;根癌农杆菌;遗传转化;愈伤组织;硝酸银;甘露醇 中图分类号: + ; 文献标识码: 文章编号: ( ) S543.603Q943 A 10045759201101010209        我国草地草场沙漠化程度日益严重,伴随着草地退化,草种急剧退化,植被组成发生变化,可食牧草比重下   降,劣质、低质杂草及毒草大量滋生,致使牧草资源日渐短缺。同时,水资源短缺以及土地的干旱、盐渍化限制园

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