（苏教版生物）2012届高三一轮《创新设计》课件：选3-1《现代生物科技专题》.pptVIP

获取信息与综合运用能力的考查 CCC↓GGG GGG↑CCC G↓AATT C C TTAA↑G A↓AGCT T T TCGA↑A G↓GATC C C CTAG↑G 识别序列及 切割位点 SmaⅠ EcoRⅠ HindⅢ BamHⅠ 限制酶 * Step 1 基础导学 基因工程的诞生和发展 应用期 DNA 双螺旋 遗传密码 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒 逆转录酶 开始期 发展期 质粒载体 质粒是细菌拟核DNA外的环状DNA小分子，可在细菌间转移。质粒是常用的转基因载体。 基因工程的概念及工具 切割 重组DNA 体外 剪切 拼接 受体细胞 表达 限制性核酸内切酶 特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平口末端 DNA连接酶 质粒 复制原点 标记基因 病毒载体 病毒很适合用于基因治疗。病毒的蛋白质外壳内能容纳多达7 500个碱基的DNA片段。当病毒侵染宿主细胞并在细胞内系列时，也将重组DNA带入到细胞中。病毒已经用于多次基因治疗的临床实验。这种方法存在的问题是宿主对病毒的免疫反应。 名师点拨 基因文库不是直接保管相应基因，而中保存受体菌(受体菌中含基因) 基因工程的一般过程(以原核生物细胞为重组DNA表达体为例) 抗原—抗体　 基因文库 PCR技术 启动子 终止子 农杆菌 阳性 核酸探针 显微注射 DNA可以通过显微注射转入动物细胞中。下图所示的是目的基因的多份拷贝正通过玻璃微型吸管注射到受精卵中。转基因小鼠和家畜都是利用这种方法产生的，但是成功率很低；只有2%～3%的受精卵发育成转基因动物，在这些动物只有一小部分表达了转入的基因。 基因枪法 这种方法是利用压缩气体产生的动力将包裹在金属颗粒表面的外源DNA打入生物组织中。常用的金属颗粒有金粉粒子或钨粉粒子。一些细胞能像表达自身基因一样表达导入的外源DNA。 基因工程的应用 缺陷基因　 遗传 抗病 产量 光合作用 抗性 物种之间 正常基因 想一想：基因治疗是针对什么样的病进行的？ 答案：基因治疗一般针对很难用一般药物进行治疗的由基因异常引起的遗传病。 蛋白质工程 基因工程 结构和功能 基因定点 重组DNA技术 天然蛋白质 基因工程 结构和功能 Step 2 核心突破 基因工程的诞生和基本操作工具 形成单链 DNA分子 形成新的DNA分子 形成重组DNA分子 形成黏性末端或平口末端 作用结果 将DNA 两条链之 间的氢键 打开　　 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 切割目的基因及载体，能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 作用特点 碱基对间 的氢键 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 作用部位 DNA 分子 脱氧核苷酸 DNA分子 片段 DNA分子 作用底物 解旋酶 DNA 聚合酶 DNA连 接酶 限制酶 　　种类 项目　　 基因工程操作程序及与蛋白质工程的比较 基因工程技术生产凝乳酶的过程 (3)转化受体细胞 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 将目的基因插入Ti质粒的TDNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达 转化过程 原核细胞 受精卵 体细胞 受体细胞 Ca2＋处理法 显微注射技术 农杆菌转化法 常用方法 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 生物种类 包括做抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能活性是否相同 个体水 平检测 杂交带 抗原—抗体杂交 目的基因是否翻译成蛋白质 翻译检测 杂交带 核酸分子杂交 目的基因是否转录出mRNA 转录检测 杂交带 核酸分子杂交 目的基因是否进入受体细胞 导入检测 分 子 检 测 结果显示 方　法 检测内容 类　型 (4)筛选重组细胞与实现功能表达 2．基因工程与蛋白质工程的比较 (1)蛋白质工程的关键技术是基因工程，通常又被称为第二代基因工程 (2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造 联　系 只能生产自然界已有的蛋白质 可生产自然界没有的蛋白质 结果 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造或生产人类所需的蛋白质 实质 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 预期蛋白质功能