酶工程原理与技术-第一章绪论.pptVIP

酶工程 韶关学院生科院 Office:英东楼 B-301 Email:yil1001@163.com Mp 662492 第一章 绪论 2 学时 酶的基本概念与发展史 酶催化作用的特点 影响酶催化作用的因素 酶的分类与命名 酶的活力测定 酶的生产方法 酶工程发展概况与前景 第一节 酶的基本概念与发展史 酶： 酶的改性：通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程 酶工程：酶的生产、改性与应用的技术过程。 酶的生产： 酶的改性：通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程 酶的应用：通过酶催化获得所需产品或去除杂质，或获得所需的信息的技术过程。 酶的转换系数：每个酶分子每分钟催化催化底物转化为产物的分子数，又称摩尔催化活性。 酶的认识及其生物学意义 远古时代的利用，中国。 1752年，法国物理学家列.奥米尔作鹰饲实验 1833年，佩恩(Payen)和帕索兹(Persoz)首先发现酶；麦芽淀粉酶 1857年，巴斯德(Pasteur)提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果； 1878年，库内(Künne)提出“酶”（Enzyme)这个名称； 1897年，巴克纳(Büchner)兄弟成功地用不含细胞的酵母汁实现了发酵，证明了发酵与细胞无关； 1913年，米彻利斯(Michaelis)提出了酶的动力学说； 1926年，萨姆纳(Sumner)第一次从刀豆中提出脲酶结晶，并证明酶具有蛋白质性质； 1930年，Northrop分离出结晶的胃蛋白酶、胰蛋白酶及凝乳蛋白酶，并进行了动力学探讨，确立了酶的蛋白质本质。 1982年，切克(Cech)等发现核糖体(RNA)也具有催化活性。 1986年，1984年列那(Lerner)和(Schultz) 发现抗体酶。 1991年，发现DNA核酸酶。 酶：即生物催化剂，是由活细胞产生的，在细胞内、外一定条件下都能起催化作用的具有高效率和高度专一性的一类特殊蛋白质。 酶能在机体内十分温和的条件下高效率地起催化作用，使得生物体内的各种物质处于不断的新陈代谢中。 第二节 酶的生物催化特性 酶与一般催化剂有共性 酶的生物催化剂特性 1、催化效率高 107-1013 2、高度的专一性 （绝对专一性和相对专一性） 3、酶易失活，需要条件温和 4、酶的活性受到调节控制 5、其催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关 酶的专一性： 根据酶专一性的严格程度，可分两类： （1）绝对专一性 （2）相对专一性 酶的专一性的确定 步骤: （1）作用底物，反应条件； （2）试验底物浓度对反应速度的影响，确定米氏常数Km； （3）同条件下，其他底物，试验该酶是否专一。 注意问题: 第三节 影响酶催化作用的因素 酶反应动力学内容，复习生化内容，不讲。 只有使这些条件达到最佳，才能最大限度发挥酶的催化功能。 第四节 酶的分类与命名 一、习惯命名法 二、系统命名法 国际酶学委员会，1956成立 酶的分类与命名：1961（1964/1972/1984） 基础：酶的专一性 酶：推荐名 葡萄糖氧化酶 系统名 根据酶促反应的底物与反应类型 ?-D-葡萄糖，氧1-氧化还原酶 [EC ] 根据作用底物是自身RNA还是其他分子，核酶分为分子内催化R酶和分子间催化R酶。每类又可分几个亚类。 （一）、分子内催化R酶： 1）、自我剪切R酶 2）、自我剪接R酶 （二）、分子间催化R酶： 1）、RNA剪切酶： 2）、DAN\剪切酶： 3)、多肽剪切酶： 4）、多糖剪切酶： 5）、多功能R酶： 第五节 酶活力的测定 酶活力，即酶的活性，是指酶催化一定化学反应的能力。 酶促反应速度，单位是：浓度/单位时间 酶促反应速度曲线： 酶活力测定：采用 各种方法测定酶量 多少的方法。 一、酶活力测定方法： 要求：快速，准确，简便，多样 两个阶段：1、酶+底物混合一段时间 2、测定底物或产物量的变化。 步骤： （1）配制底物溶液 （2）确定反应条件 （3）反应开始，记时间 （4）测定产物的生产量或底物的减少量 二、酶活力单位 酶活力的高低，是以酶活力单位数来表示。 1个活力单位：在特定条件下，每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量。 1kat单位：在特定条件下，每1sec催化1mol的底物转化为产物的酶量。 1kat=6×107IU 比活力：在特定条件下每1mg酶蛋白所具有的酶活力单位数。 即酶比活力＝酶活力／mg酶蛋白 三、固定化酶的活力测定 固定化酶：与水不溶性载体结合，在一定范围内其催化作用的酶。 其活力测定方法： （1）振荡测定法 （2）柱法测定 （3）连续测定 （4）固定化酶的比活力测定 （5）酶结合效率与酶活力回收率的测定 酶的结合效率：吸附的总