超滤标准规范操作规程.docVIP

长春长生生物科技股份有限公司企业标准 文件编码 总页数 6 起草人 起草日期 年 月 日 审核人 审核日期 年 月 日 批准人 批准日期 年 月 日 执行日期 年 月 日 颁发部门 生产管理部 版本号 印数 甲型肝炎减毒活疫苗原液超滤SOP 目的特制定本操作规程。 范围 本操作规程适用于CUF-20型超滤器超滤透析甲肝原液。 职责: 纯化组人员2/6 1.1.2 操作间备有废弃物收集容器。 1.1.3 生产状态标识已挂好。 1.1.4 提前30分钟开启层流罩。 2 设备仪器运行检查 1.2.1 超滤器 型号：CUF-20 资产编号：01D002074 厂家：美国密理博公司 状态完好，备用。 1.2.2 蠕动泵 型号：ZG60-600 资产编号：01G001061 厂家：保定兰格恒流泵有限公司。状态完好，备用。 3 物料及器具检查 透析液：核实批号、数量及有效期。 1.3.2 0.1NNaOH：核实批号、数量及有效期。 1.3.3 10倍浓缩199培养液、8.0%碳酸氢钠液：核实批号、数量及有效期。 1.3.4 待透析原液的确认:确认原液的批号及液量。 1.3.5 0.1%新洁尔灭溶液或3%来苏儿溶液：经0.2um除菌过滤. 核实批号及有效期。 长春长生生物科技股份有限公司企业标准 文件名称： CUF-20型超滤器SOP 执行日期 文件编号： 页 码 3/6 1.3.6 10L瓶、 桶盖、 10号栓、 100mL瓶、 10mL吸管、 钢瓶经0.105Mpa.121C 60分钟湿热灭菌，核实数量及有效期。 1.3.7 超滤管道 、分液管道、50L桶、20L桶经0.105Mpa.123C 、90分钟湿热灭菌，核实数量及有效期。 2. 操作过程 2.1 启动蠕动泵，进液管道、 回液管道、 膜下排液管道用0.1N NaOH溶液循环30分钟。 2.2 管道连接：进液管道、回液管道、膜下管道和已灭菌的超滤管道无菌连接。膜下排液管道无菌放入回收桶中，将收集原液的管道放入20L桶内，用止血钳夹住，待收集原液备用。 2.3 冲洗膜 2.3.1 用另外20L 0.1N NaOH冲洗膜包。 2.3.2 用透析液冲洗膜包：关闭部分回流阀门，打开膜下滤出阀门，用透析液冲洗膜包，至回流端和膜下的液体pH值呈中性。 2.4 取样：核对原液批号、液量，用10mL吸管取样至青瓶，抗原1mL ，三氯甲烷残留量3 mL，青瓶盖栓写标签待检。 2.5 透析：原液用透析液5-7倍稀释.将超滤器的进液管道放入透析液稀释后的原液瓶内，打开回液管道的止血钳，检查各连接管道连接是否正确，连接管道是否渗漏，各管道不要折皱，然后启动蠕动泵，调节泵速，使进液端压力控制在1.0bar-1.5bar，回流口端压力控制在 长春长生生物科技股份有限公司企业标准 文件名称： CUF-20型超滤器SOP 执行日期 文件编号： 页 码 4/6 0.4 bar-0.9 bar之间。在透析过程中，不要停止蠕动泵，回液瓶中一定要确保原液收回量80%的液体在循环。 2.5.1回收原液：当全部原液透析完之后，回流阀门全部打开，关闭膜下滤出阀，打开收集原液管道的止血钳，用199培养液将原液连续3次循环回收20L桶内，每次循环5分钟，泵速由慢至透析泵速：4升/分钟(收回透析原液量)。为确保病毒不损失，可再反复收集3次，关闭蠕动泵。(收集时也可适当浓缩，浓缩则透析时间短，则回收率高,。但是浓缩倍数过大则易导致病毒聚集，不易回收，影响收率。) 2.5.2 回收原液取样：用10mL吸管取样，抗原1mL 、三氯甲烷残留量3 mL、病毒滴度2 mL 、牛血清白蛋白残留量1mL 、异常毒性15 mL，盖栓写标签待检。 将回收的原液用分液管道分至10L(或5L)钢瓶内，每个钢瓶做无菌检查、支原体检查。包好瓶口，放置-60C冰箱。 6 清洗超滤器：用灭菌注射用水冲洗膜，冲洗体积： 膜包面积 冲洗体积 0.5㎡标准膜包 10升 3. 膜包的完整性检测 3.1首先确定系统已经清洗好。 3.2 将超滤系统内的水排空。 3.3 调节进口压力至规定压力。 长春长生生物科技股份有限公司企业标准 文件名称： CUF-20型超滤器SOP 执行日期 文件编号： 页 码 5/6 3.4 把回流口用阀门或其他方法封闭。 3.5 膜下排液管道口是开放的。 3.6 稳定超滤系统的规定压力5分钟让残留的水排走。 3.7测量并记录气压、 温度和从透液口出来的气体流量.气体流量可用气体流量计测量或用量筒测量(一定时间内在倒置的灌满水的量筒中有多少体积水被排走) 充分湿润的完整的超滤膜