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题目：抗体测定技术的标准操作规程 目的：规范抗体测定（ELISA）试验技术的标准。 操作： 目的：测定给予动物供试品后，血清（血浆）中是否产生抗体（或抗原）。 材料与方法： 2．1材料： 2．1．1物品：加样器（包括1000ul、200ul、20u），吸头（1000ul、200ul、20u），吸纸，小玻璃瓶，酶联板，酶联仪。 2．1．2试剂： 2．1．2．1包被液：PH9.6的碳酸-重碳酸盐缓冲液 配法：A液：0.2M碳酸钠水溶液，无水碳酸钠（Na2CO3）21.2g加蒸馏水至1000ml。 B液：0.2M碳酸钠，NaHCO3 16.8g加蒸馏水至1000ml。 取A液16ml，B液34ml，再加蒸馏水至200ml，即为所需液。 2．1．2．2 PH7.4磷酸盐缓冲液（PB） 配法：A液：0.2M碳酸氢二钠(NaH2PO4)水溶液 0.2M NaH2PO4.H2O27.6g ，溶于蒸馏水中，最后稀释至1000ml。 B液：0.2M磷酸氢二钠Na2HPO4水溶液 0.2M NaH2PO4.7H2O 53.6g ，或NaH2PO4.12H2O 71.6g或NaH2PO4.2H2O 35.6g，溶于蒸馏水中，最后稀释至1000ml。 0.2MPH7.4 PB：取A液19ml，B液81ml即可。 2．1．2．3 PH5.0 柠檬酸-磷酸缓冲液 配法：A液：0.1M柠檬酸水溶液，柠檬酸（C6H8O7。H2O）21.0g(或C6H8O710 .21g) 加蒸馏水至1000ml。 B液：0.2M磷酸氢二钠Na2HPO4水溶液 PH5.0柠檬酸-磷酸缓冲液：取A液24.3ml，B液25.7ml，加蒸馏水至100ml即可。 2．1．2．4 固定液：2.5%戊二醛，用0.02MPH7.4PB稀释。 2．1．2．5 洗板液：0.02%吐温20，用0.01MPH7.4PB稀释。 2．1．2．6封闭液：5%BSA（牛血清白蛋白），0.02MPH7.4PB用稀释。 2．1．2．7反应液：PH5.0柠檬酸-磷酸缓冲液10ml+opd7mg+过氧化氢7ul（现用现配）。 2．1．2．8稀释液：（稀释I抗）：1%BSA，用0.02MPH7.4PB稀释。 2．1．2．9终止液：2NH2SO4（浓硫酸稀释18倍）。 2．2方法： 2．2．1包被：PH9.6碳酸-重碳酸盐缓冲液包被，100ul/孔，4℃过夜。 2．2．2固定：每孔直接加2.5%戊二醛100ul，37℃30分钟。 2．2．3冲洗：倒掉固定液，拍干酶联板，用洗板液洗板3次，拍干酶联板。 2．2．4封闭：每孔加入5%BSA 100ul，37℃1.5小时。（非特异性结合） 2．2．5加样：甩掉封闭液，加样。 用1%BSA稀释待测血清，阴性及阳性血清（从1：50视情况开始2倍梯度稀释，1：50→1：100→1：200→1：400……）。加样后37℃1小时。 2．2．6冲洗：用洗板液洗板6—8次，每次洗后拍干酶联板。 2．2．7加Ⅱ抗：用0.02M7.4PB稀释Ⅱ抗，每孔100ul，37℃30分钟（Ⅱ抗含HRP）。 2．2．8冲洗：用洗板液洗板6—8次，每次洗后拍干酶联板。 2．2．9显色：每孔加新配制的反应液100ul。 2．2．10终止：加反应液顺序加终止液，100ul/孔。 2．2．11比色：OD450读数。 2．2．12统计结果：常用X±3SD，与对照组比较。 下面是古文鉴赏，不需要的朋友可以下载后编辑删除！！谢谢！！ 九歌·湘君?屈原??朗诵：路英君不行兮夷犹，蹇谁留兮中洲。?美要眇兮宜修，沛吾乘兮桂舟。?令沅湘兮无波，使江水兮安流。?望夫君兮未来，吹参差兮谁思。?驾飞龙兮北征，邅吾道兮洞庭。?薜荔柏兮蕙绸，荪桡兮兰旌。?望涔阳兮极浦，横大江兮扬灵。?扬灵兮未极，女婵媛兮为余太息。?横流涕兮潺湲，隐思君兮陫侧。?桂棹兮兰枻，斫冰兮积雪。?采薜荔兮水中，搴芙蓉兮木末。?心不同兮媒劳，恩不甚兮轻绝。?石濑兮浅浅，飞龙兮翩翩。?交不忠兮怨长，期不信兮告余以不闲。?朝骋骛兮江皋，夕弭节兮北渚。她含着笑，切着冰屑悉索的萝卜，??她含着笑，用手掏着猪吃的麦糟，??她含着笑，扇着炖肉的炉子的火，??她含着笑，背了团箕到广场上去??晒好那些大豆和小麦，??大堰河，为了生活，??在她流尽了她的乳液之后，??她就用抱过我的两臂，劳动了。??大堰河，深爱着她的乳儿；??在年节里，为了他，忙着切那冬米的糖，??为了他，常悄悄地走到村边的她的家里去，??为了他，走到她的身边叫一声“妈”，??大堰河，把他画的大红大绿的关云长??贴在灶边的墙上，??大堰河，会对她的邻居夸口赞美她的乳儿；??大堰河曾做了一个不能对人说的梦：??在梦里，她吃着她的乳儿的婚