2017_2018学年度高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养练习新人教版选修1.docVIP

课题1微生物的实验室培养 培养基及无菌技术 [自读教材·夯基础] 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养物质。 (3)营养成分：水、无机盐、碳源、氮源，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。 2．无菌技术 (1)目的：获得纯净培养物。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法[连线]： 　　 1．下面是查氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题： 蔗糖 15 g NaNO3 3 g K2HPO4 1 g KCl 0.5 g MgSO4·7H2O 0.5 g FeSO4 0.01 g 琼脂 15～20 g 水 定容至1 000 mL (1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基？为什么？ 提示：固体培养基。因为该培养基加入了凝固剂琼脂。 (2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是什么？ 提示：4类物质。分别是碳源、氮源、无机盐和水。 (3)蔗糖提供的是哪类营养物质？NaNO3提供的是哪类营养物质？ 提示：蔗糖提供的是碳源。NaNO3提供的是氮源和无机盐。 (4)在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物所需要的哪些条件？ 提示：满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需要。 2．探讨培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气和牛奶所采用的灭菌或消毒方法。 提示：分别为高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。 3．消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？ 提示：消毒是杀灭病原微生物和有害微生物，并不要求杀灭一切活的微生物；而灭菌则是杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。 [跟随名师·解疑难] 1．培养基的成分 营养物质 定义 作用 主要来源 碳源 凡能提供所需碳元素的物质 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质 无机化合物：CO2、NaHCO3等；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 氮源 凡能提供所需氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 生长因子 生长必不可少的微量有机物 酶和核酸的组成成分 维生素、氨基酸、碱基等 水 在生物体内含量很高 不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定 外界摄入 无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素 细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂 无机化合物 2.实验室常用的消毒和灭菌方法 项目 概念 常用方法 应用范围 消毒 使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法：在100 煮沸5～6 min 一般物品 巴氏消毒法：在70～75 煮30 min 或在80 煮15 min 一些不耐高温的液体，如牛奶 化学药剂消毒法 如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒法：紫外灯照射30 min 接种室、操作台 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 灼烧灭菌：酒精灯火焰 接种工具的灭菌和试管口的灭菌 干热灭菌：在160～170 下灭菌1～2 h 玻璃器皿、金属工具的灭菌 高压蒸汽灭菌：在压力为100 kPa，温度为121 的条件下，灭菌15～30 min 培养基及容器的灭菌 大肠杆菌的纯化培养 [自读教材·夯基础] 1．制备固体培养基 2．纯化大肠杆菌 (1)方法： 平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (2)鉴定：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_恒温箱中，培养12 h和24 h后，分别记录观察。 (3)菌种保存： 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。 1．培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板，你用什么办法来估计培养基的温度？ 提示：可以用手触摸，感觉上以刚不烫手为准。 2．如果需要调节培养基的pH，应在哪一步骤后进行？ 提示：溶化后，灭菌前。 3．在用平板划线法接种大肠杆菌时，第一次划线前、每次划线前及划线操作结束后，都要灼烧接种环，请分析其目的分别是什么。 提示： 第一次灼烧 每次划线前灼烧 划线结束灼烧 目 的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上次划线结束后接种环上残留的微生物，使每次划线的微生物来自上次划线末端 杀死接种环上残留的菌种，避免