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* * * * * * 6.2.6 LB膜法 图6.10 酶LB膜的制作过程。 酶LB膜的制作过程 优缺点: 酶膜可以制得很薄(数纳米),厚度和层数可以精确控制,可以获得高密度酶分子膜; 制备困难,稳定性不好。 * 6.2.7 层层组装法(LBL, Layer-by-Layer) 图6.11 LBL方法构筑多层膜。 利用酶等当点,把酶当作大阴离子或阳离子,和其它大阳离子(如聚赖氨酸、聚烯丙胺)和大阴离子等,在基底表面层层组装。 * 6.2.7 层层组装法(LBL, Layer-by-Layer) 生物素(biotin)是广泛分布于 动植物体内的一种生长因子, 又称辅酶R或维生素H。 亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成。二者有高度亲和力,且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性。 链霉亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(avidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。 * 6.2.7 层层组装法(LBL, Layer-by-Layer) 生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS) 一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点 的信号放大标记技术。 * 6.2.7 层层组装法(LBL, Layer-by-Layer) 优缺点:能通过控制组装层数来调节酶电极响应 的电流密度; 固定量小,需控制一定条件。 图6.12 用生物素层层组装法制备酶电极 * 为应用制定明细规范。 选定选择性基元。 选择转换器。 选定固定化方法。 当设计一种新的传感器时要考虑的主要要素: 所要求的特性因子。 传感器的结构。 传感器的操作。 传感器测试。 6.3 传感器的制备 * 一、 血液中葡萄糖的测定 1.1 目标 要提供一种简单的、可携带的、适用于在家糖尿病病人为常规监测其血液中葡萄糖含量的传感器。 1.1.1 应用给定的技术条件 传感器必须是简单的、可靠的和价廉的。 1.1.2 选定有关选择性基元 葡萄糖氧化酶(GOD) * 一、 血液中葡萄糖的测定 1.1.3 选择转换器 电流型的电化学转换器。 媒介体:二茂铁衍生物 1.1.4 选定固定化方法 共价键连方法 * 一、 血液中葡萄糖的测定 ----电流型生物传感器 1.1.5 要求的特定因子 血液葡萄糖范围为1.1 ? 33.3mmol/L。 精度为 ?3% ? 8%。 试验时间需 30s。 传感器寿命—封入片中的葡萄糖酶试验电极片至少有6个月的寿命。 * 一、 血液中葡萄糖的测定 ----电流型生物传感器 1.1.6 传感器的结构 * 一、 血液中葡萄糖的测定 ----电流型生物传感器 1.1.6 传感器的结构 * 一、 血液中葡萄糖的测定 ----电流型生物传感器 1.1.7 传感器的操作 * 一、 血液中葡萄糖的测定 ----电流型生物传感器 1.1.8 传感器试验 精度 准确度 将传感器与供试验室使用Yellow Springs的仪器公司生产的血液葡萄糖监测装置相比较。 医务护理人员和医疗技术人员作获得的结果与血多病人获得的结果相比较。 参 数 样 品 1 2 3 读 数 平均浓度/(mmol/L) 标准偏差 偏离系数/% 20 20 20 3.0 4.8 15.5 0.24 0.19 0.52 8.1 3.9 3.3 * 二、水中钾离子的测定 2.1 测定钾离子方法的述评 存在的问题:高浓度Na+ 的干扰 2.2 目标 要提供一种在高浓度Na+共存下,选择性地检测钾离子的传感器。 四苯硼钠比浊法、火焰光度分析法、 离子选择性电极法、酶法 * 2.2.1 应用给定的技术条件选定有关选择性基元 二、水中钾离子的测定 Anal. Chem. 2002, 74, 330-325. * 2.2.3 选择转换器 紫外可见吸收光谱仪转换器。 2.2.4 传感器的结构
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