探讨麸酸胺环化酶GlutaminylCyclase在果蝇体内扮演的角色.PDFVIP

探討麩酸胺環化酶(Glutaminyl Cyclase)在果蠅體內扮演的角色 研究者：沈郁軒 指導者：陳光超教授 林玟娟老師 摘要 麩酸胺環化酶(Glutaminyl Cyclase, QC)在生物體內扮演重要的角色，在人體內 調控許多帶有蛋白質 N 端焦麩胺酸(pyroglutamic acid, pGlu) 殘基的蛋白質 ，研究更 發現 QC 也和神經退化性疾病如阿茲海默症的成因有關。本實驗以模式動物 －果蠅 做為實驗對象，利用 QC 抑制劑 PBD-150 、N ω-Acetylhistamine 、1-Benzylimidazolec 和利用 UAS-GAL4 system 調控 QC 基因表現量來探討 QC 在果蠅體內扮演的角色。 壹 、研究動機 一、背景介紹 (一) 麩酸胺環化酶(Glutaminyl Cyclase, QC) 很多哺乳類肽類激素、和植物性、動物性蛋白質含有蛋白質 N 端焦麩 胺酸(pyroglutamic acid, pGlu) 殘基，調控生物體內交互作用和增加蛋白質 穩定性使其 N 端不會被降解。麩酸胺環化酶(Glutaminyl Cyclase, QC)在不 同的植物和動物中分離出來，會催化 pGlu 的形成 。從動物和植物QC 的 三維結構中可以清楚的看出兩者並不同源，其酵素的機制也有很大的不同。 動物和植物的 QC 受質異質性是它具有廣泛的受質專一性的原因，其受質 包括細胞激素、基質蛋白和病原性相關蛋白等，而 QC 催化 pGlu 的形成 也是阿茲海默症的成因之一。動物 pGlu 和植物 pGlu 在增加穩定性的功能 和胜肽結構有著高度的相似性，很有可能是因為在生物中催化 pGlu 形成 的需求導致 QC 在兩個界中各自獨立演化的結果。 穀氨醯胺 (glutamine, Q) 穀氨酸鹽 (glutamate, E) 圖 1 QC 催化反應 pGlu 是一種環狀胺基酸，在細胞代謝的過程中或是在分泌蛋白的 N 端上形成。以前認為 pGlu 殘基在蛋白質 N 端上由脫酰胺在體內自 322 發形成，然而 1963 年，研究發現 Carica papaya 的乳汁中的 QC 會催 化谷氨酰胺殘基的環化，24 年後在哺乳類動物腦下垂體萃取物中找到 了同樣酵素機制的 QC 。最近研究發現QC 也會催化 N 端穀氨酰殘基 的環化，顯示出可能和人類遺傳性神經退化疾病相關。 圖 2 human QC(hQC, 左)和 Carica papaya QC (pQC, 右) 三維結構圖 圖 3 人體中含有 pGlu 殘基之胺基酸和其功能 (二) Secretory QC (sQC) 和 Golgi-resident QC (gQC) 人體中有兩種 QC ，分別為secretory QC (sQC) 和 Golgi-resident QC (gQC) ，功能和結構上皆有差異，gQC 在蛋白質結構尚與 sQC 相似，但是 gQC 的活性位相對有更大的區域帶負電，區別了 sQC 和 gQC 的受質專一 性，因此不同的抑制劑對兩種 QC 也有不同程度的抑制效果。 323 圖 4 不同的 QC 抑制劑對 sQC 和 gQC 的抑制效果 麩酸胺環化酶可以催化多胜肽和蛋白質 N 端焦