氨基酸代谢 - PowerPoint Presentation.pptVIP

好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 * * 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 氨基酸代谢 The metabolism of amino acid 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 联合脱氨基作用是大多数氨基酸的主要代谢方式。 氨基酸分解代谢的主要途径是脱氨基作用，生成氨(ammonia)和相应的α-酮酸； 氧化脱氨基、联合脱氨基和非氧化脱氨基 是氨基酸的三种脱氨基方式。 ◇ 背景知识 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 白化病 苯丙酮尿症 氨基酸的代谢异常与疾病 苯丙氨酸羟化酶遗传性缺陷可致苯丙酮酸尿症，酪氨酸酶遗传性缺陷可致白化病 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 ★ 了解氨基酸代谢的方式。 ★ 掌握联合脱氨基作用的检定方法。 ◇ 实验目的 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 a －丙氨酸 a －酮戊二酸 谷丙转氨酶 （GPT） 丙酮酸 谷氨酸 NADH（NADPH)+NH3+H+ 谷氨酸脱氢酶 NAD + （NADP +)+H20 苯肼为转氨酶的抑制剂，可以阻断联合脱氨基。 本实验以谷丙转氨酶为底物，以苯肼为抑制剂，观察抑制剂对氨生成的影响。 联合脱氨基，是指氨基酸的转氨基作用和氧化脱氨基作用的联合，其过程是氨基酸首先与α－酮戊二酸在转氨酶催化下生成相应的α－酮酸和谷氨酸，谷氨酸在L-谷氨酸脱氢酶作用下生成α－酮戊二酸和氨，α－酮戊二酸再继续参与转氨基作用。 ◇ 实验原理 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 Conway扩散皿 内室放稀盐酸，外室放一侧放氢氧化钠溶液，另一侧放反应后溶液。 盖上玻璃片，将反应液混合后置于温箱内反应。 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 ◇ 实验步骤 1 肝匀浆的制备 2 联合脱氨基作用的反应体系 3 等温蒸馏 4 显色 5 计算 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 取0.5克肝组织，加入4.5%预冷的PH4.0的磷酸盐缓冲液，制成10%的肝匀浆。 玻璃匀浆器 使用时注意事项 ★ 用力但不要用力过猛，以免管子被捣破。 ★ 动作要迅速，以免酶活性丧失。 ★ 用后要立即清洗管子。 1 肝匀浆的制备 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 2 联合脱氨基作用的反应体系 取三支试管，按顺序在各个管中加入以下试剂。 1 对照管 2 测定管 3 抑制管 谷丙转氨酶底物液（ml） 1% NAD＋溶液（ml） 1% 苯肼溶液（ml) 10 % 三氯醋酸（ml) 0.8 0.8 0.8 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.5 － － － 好运动者健，好思考者智，好助人者乐好读书者博，好旅游者悦，好追求者成 持续更新●▂●请收藏 10 % 三氯醋酸（ml) 1% 苯肼溶液（ml) 1 对照管 2 测定管 3 抑制管 0.5 0.5 0.1 － － － 将以上反应体系于37℃水浴中预温5分钟。各管加入10%肝匀浆液0.5ml, 37℃水浴中保温45分钟。按顺序在各个管中加入以下试剂。