apkcι信号通路阻断剂atm抑制肝癌上皮细胞间质细胞转化和侵袭转移的作用分析 word格式.docxVIP

目录缩略词表………………………………………………………………………………（1）摘要……………………………………………………………………………………（2）Abstract………………………………………………………………………………（3）前言……………………………………………………………………………………（4）1 第一部分1.1 引言………………………………………………………………………………（6）1.2 材料与方法………………………………………………………………………（6）1.3 结果………………………………………………………………………………（13）1.4 讨论………………………………………………………………………………（17）1.5 参考文献…………………………………………………………………………（19）2 第二部分2.1 引言………………………………………………………………………………（22）2.2 材料与方法………………………………………………………………………（22）2.3 结果………………………………………………………………………………（25）2.4 讨论………………………………………………………………………………（29）2.5 参考文献…………………………………………………………………………（31）3 第三部分3.1 引言………………………………………………………………………………（34）3.2 材料与方法………………………………………………………………………（34）3.3 结果………………………………………………………………………………（36）3.4 讨论………………………………………………………………………………（42）3.5 参考文献…………………………………………………………………………（44）综述…………………………………………………………………………………（48）致谢…………………………………………………………………………………（62）附录1（攻读学位期间发表论文目录）…………………………………………（64）缩略词表缩写英文全称中文注译aPKCιATMatypicalproteinkinaseCιaurothiomalate非典型蛋白激酶Cι金硫苹果酸根CMLchronicmyelogenousleukemia髓细胞性白血病EGFepidermalgrowthfactor表皮生长因子EMTepithelialto mesenchymaltransition上皮细胞间质细胞转化HCChepatocellularcarcinoma肝细胞肝癌IGF-IIMMH-D3cellsinsulin-like growthfactorII胰岛素样生长因子II永生化的小鼠肝细胞MMH-Rcells持续表达v-Ha-Ras基因和GFP的细胞称为MMH-R细胞MMH-RTcells使用TGF-β1 刺激的MMH-R细胞称为MMP10matrixmetalloproteinase10MMH-RT细胞基质金属蛋白酶10NSCLCnon-smalllungcancer非小细胞肺癌RArheumatoid arthritis风湿性关节炎TGFβ1 ZEB1transforming growthfactorβ-1 zincfingere-boxbindingprotein1转化生长因子β1锌指e-box 结合蛋白摘要目的：为了研究aPKCι信号通路在肝癌上皮细胞-间质细胞转化中的功能和调节机制，并为进一步寻找治疗肝癌的靶向药物打下基础。方法：通过TGF-β1 的刺激和慢病毒感染v-Ha-Ras基因，构建出肝癌的EMT模型细胞MMH-RT细胞。进而通过Westernblot检测aPKCι和EMT标志物的表达情况，分析aPKCι与肝癌细胞EMT之间的关系。在MMH-RT细胞中验证ATM对aPKCι信号通路的阻断作用。进而在经过ATM处理后的细胞，通过Transwell和FACS检测肝癌细胞侵袭力和凋亡的改变。结果：我们的研究指出，在TGF-β1刺激下的MMH-R细胞发生EMT并伴随aPKCι 的过表达。另外我们验证了aPKCι信号通路阻断剂ATM可以抑制肝癌细胞的EMT 并降低侵袭力。此外，ATM可以选择性的抑制间质表型的细胞和HepG2肝癌细胞的增殖，并促进其凋亡。同时，ATM可以促进上皮表型的细胞增殖并对其凋亡和侵袭影响不大。结论：我们的研究指出aPKCι是肿瘤EMT的重要标志物，同时可以作为判断肝癌侵袭力和恶性程度的标志。ATM或许是一种具有前景的治疗肝癌的靶向药物。关键词：上皮细胞间质细胞转化；非典型蛋白激酶Cι；肝细胞肝癌；金硫苹果酸根；靶向药物AbstractPurp