比较不同脂质体在皮肤和增生性瘢痕中的渗透作用-外科学(整复外科学)专业论文 word格式.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 第一部分 5-FU 传递体和乙醇脂质体混悬液、凝胶的制备 及质量评价 1992年由Ceve等人研制了传递体，2004年Touitou等人发展了乙醇脂质体。传递 体是在普通脂质体的组分中加入了一定量的胆酸钠、吐温-80或司盘-80等表面活性 剂，这样可以降低脂质体表面的磷脂双分子层的表面张力，提高了柔韧度，也相应 增加了脂质体的变形能力。因此，目前认为传递体在透皮载药过程中可以通过自身 的变形能力，穿透约为自身1/5～1/10大小直径的小孔，从而大大提高了对皮肤的通 透性。乙醇脂质体是在其组成成分中加入了较大比例的乙醇，乙醇可以加大脂质体 膜的流动性和柔性，提高乙醇脂质体本身的变形能力，而且乙醇脂质体易于同表皮 角质细胞的包膜融合，大大提高了对药物的促渗作用。与普通脂质体相比，传递体 和乙醇脂质体可以穿透表皮角质层，甚至到达真皮深层，而且具有更大的皮肤滞留 药量，大大提高了药物的靶向作用，被证明是目前经皮给药最为理想的两种脂质体 药物载体，故本实验选这两种脂质体为研究载体。 脂质体混悬液的保湿性、粘附性较差，不便于涂抹，有学者将普通脂质体混悬 液制备成凝胶[28-30]，并且已经展现出许多优点，如具有良好的粘附性能、可生物降 解、无残留和毒副作用。本研究采用改良的薄膜分散法和Touitou等的方法制备纳米 级5-FU传递体和乙醇脂质体的混悬液，并将两种脂质体制备成相应的凝胶剂，进行 形态、粒径大小和分布、包封率等性质的质量评价。 1 材料和方法 1.1 主要仪器设备 R201 旋转蒸发仪 上海申胜生物技术有限公司 W201B 恒温水浴锅 上海申胜生物技术有限公司 循环水式多用真空泵 SHB-ⅢA 上海豫康科教仪器设备有限公司 CQ2200 超声波清洗器 上海弘兴超声电子仪器有限公司 DIF-6050 真空干燥箱 上海精宏实验设备有限公司 NDJ-1 型粘度仪 上海永孚仪器有限公司 粒度仪 380zls NICOM 美国 PSS 公司 JEM-2010 透射电子显微镜 日本电子株式会社 FEI SIRION 200 扫描电子显微镜 英国 OXFORD 公司 高效液相色谱分析仪 2695 美国 Waters 公司 LiposoFast 薄膜挤出仪和挤出膜 加拿大 AVESTIN 公司 激光共聚焦显微镜 510 ZEISS 日本 NIKON 公司 Avanti 30 离心机 加拿大 Beckman 公司 IKA T18 高速分散机 德国 IKA 公司 1.2 主要试剂 5-FU 国药集团化学试剂有限公司 大豆卵磷脂 PC≥94%，德国 Lipoid GmbH 公司 吐温-80 国药集团化学试剂有限公司 三氯甲烷 国药集团化学试剂有限公司 无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 罗丹明 6GO 德国 Waldeck GmbH 公司 卡波姆 国药集团化学试剂有限公司 海藻酸钠 国药集团化学试剂有限公司 羟丙基甲基纤维素 国药集团化学试剂有限公司 羟甲基纤维素钠 国药集团化学试剂有限公司 Sephadex G250 凝胶 瑞典 Pharmacia 公司 磷酸盐缓冲液 自配 1.3 实验方法 1.3.1 脂质体混悬液的制备 1.3.1.1 载 5-FU 传递体混悬液的制备 参考并改进 Cevc 等制备传递体的方法，即改良的薄膜分散法： （1） 将大豆卵磷脂：吐温-80 以 1：6.25(w/v)溶于 20ml 三氯甲烷，真空旋转蒸发(40 ℃，150rpm，20min，-100kpa)，蒸干有机溶剂成膜。 （2） 真空干燥过夜除去痕量三氯甲烷(25℃，-100kpa)。 （3） 加入含 5-FU 的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS, pH 7.4)充分旋转 混匀(20min，150rpm)。 （4） 高速分散机均质分散 5min，冷却至室温后，水浴超声(25℃，30min)以得到更 小粒径的传递体。 （5） 之后使用挤出仪，使传递体混悬液通过 50nm 孔径的聚碳酸酯膜，来回 30 次， 制得粒径均一的传递体。 最后得到 0.4%（w/v）的 5-FU 传递体的混悬液，其中磷脂含量为 4%（w/v）。 如要制备有荧光剂标记的传递体，则步骤（3）改为加入含罗丹明 6GO（Rhodamine 6GO，Rho）和 5-FU 的 PBS，充分旋转混匀(20min，150rpm)。最后得到 0.03%（w/v） 的罗丹明 6GO、0.4%（w/v）的 5-FU 传递体的混悬液，其中磷脂含量为 4%（w/v）。 1.3.1.2 载 5-FU 乙醇脂质体混悬液的制备 参考 Touitou 等制备乙醇脂质体的方法： （1） 精确称取 120mg 大豆卵磷脂溶解于 1.8ml 乙醇