表达绿色荧光蛋白的重组人偏肺病毒的构建及其致病性的研究-基础兽医学专业论文 word格式.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 1 引言 1 HYPERLINK \l _bookmark1 1.1 人偏肺病毒概述 1 HYPERLINK \l _bookmark2 1.1.1 人偏肺病毒分类地位 1 HYPERLINK \l _bookmark3 1.1.2 HMPV 基本特征 1 HYPERLINK \l _bookmark4 1.1.3 流行病学特征 2 HYPERLINK \l _bookmark5 1.1.4 致病机理 5 HYPERLINK \l _bookmark6 1.1.5 症状和病理变化 6 HYPERLINK \l _bookmark7 1.1.6 诊断及疫苗开发 7 HYPERLINK \l _bookmark8 1.2 HMPV 的分子生物学 8 HYPERLINK \l _bookmark9 1.3 HMPV 作为活病毒疫苗载体研究进展 11 HYPERLINK \l _bookmark10 1.4 反向遗传操作技术 11 HYPERLINK \l _bookmark11 1.4.1 正链 RNA 病毒的反向遗传操作 12 HYPERLINK \l _bookmark12 1.4.2 负链 RNA 病毒的反向遗传操作 12 HYPERLINK \l _bookmark13 1.4.3 双链 RNA 病毒的反向遗传操作 13 HYPERLINK \l _bookmark14 1.4.4 反向遗传学技术的应用 13 HYPERLINK \l _bookmark15 1.5 本研究目的和意义 14 HYPERLINK \l _bookmark16 2 实验部分 14 HYPERLINK \l _bookmark17 2.1 实验一、表达绿色荧光蛋白的重组人偏肺病毒的构建和拯救 14 HYPERLINK \l _bookmark18 2.1.1 材料 14 HYPERLINK \l _bookmark19 2.1.1.1 主要试剂和仪器 14 HYPERLINK \l _bookmark20 2.1.1.2 细胞系 15 HYPERLINK \l _bookmark21 2.1.1.3 质粒 15 HYPERLINK \l _bookmark22 2.1.1.4 引物 15 HYPERLINK \l _bookmark23 2.1.2 方法 15 HYPERLINK \l _bookmark24 2.1.2.1 表达 EGFP 重组 HMPV 全长基因组克隆的构建 15 HYPERLINK \l _bookmark25 2.1.2.2 转染质粒的准备 17 HYPERLINK \l _bookmark26 2.1.2.3 病毒的拯救 17 HYPERLINK \l _bookmark27 2.1.2.4 救获病毒的鉴定 18 HYPERLINK \l _bookmark28 2.1.2.5 重组病毒 rHMPV NL/1/99-EGFP 的遗传稳定性 19 HYPERLINK \l _bookmark29 2.1.2.6 重组病毒的滴定 19 HYPERLINK \l _bookmark30 2.1.2.7 重组病毒生长动力学测定 19 HYPERLINK \l _bookmark31 2.1.2.8 温度对重组病毒的影响 19 HYPERLINK \l _bookmark32 2.1.2.9 免疫实验 20 HYPERLINK \l _bookmark33 2.1.2.10 中和实验 20 HYPERLINK \l _bookmark34 2.1.2.11 救获病毒的纯化 20 HYPERLINK \l _bookmark35 2.1.2.12 纯化病毒的鉴定 20 HYPERLINK \l _bookmark36 2.1.3 结果 21 HYPERLINK \l _bookmark37 2.1.3.1 表达 EGFP 重组 HMPV 全长基因组克隆的构建 21 HYPERLINK \l _bookmark38 2.1.3.2 从 cDNA 克隆拯救感染性重组 HMPV 23 HYPERLINK \l _bookmark39 2.1.3.3 救获病毒的鉴定 24 HYPERLINK \l _bookmark40 2.1.3.4 重组病毒 rHMPV NL/1/99-EGFP 的遗传稳定性 26 HYPERLINK \l _bookmark41 2.1.3.5 重组病毒的滴定 27 HYPERL