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病理检验技术;第六章 组织制片技术 ;学 习 目 标;第一节 组织块的处理;（二）注意事项 1.避免组织结构变形 切取组织的刀、剪应锋利，刀体宜薄，并有足够的长度。 2.组织块大小适当 通常切取的组织块厚约0.2~0.3cm，大小以1.0~1.5cm×1.0~1.5cm为宜。 3.及时取材 4.标明包埋方向 5.染色、包裹小标本 6.充分暴露病灶 取材应避免过多的坏死组织或凝血块 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材 10.认真核对;二、固定和固定液将组织浸入某些化学试剂，使组织细胞内所含物质尽量保持在生活状态时的形态结构和位置的过程，称为固定所使用的化学试剂称为固定液;（二）固定方法 细胞的主要组成成分是蛋白质、脂类及糖类，应根据观察目的和诊断要求，选用相应的固定液和固定方法，使其凝固或沉淀。 常用的固定方法有以下几种： 1.浸泡固定法 2.注射、灌注固定法 3.微波固定法 4.蒸气固定法;（三）常用固定液 1.单纯固定液 是指有一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括：重铬酸钾、苦味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等。 常用的有： 甲醛（福尔马林）、乙醇、乙酸（冰醋酸、醋酸);2.混合固定液 是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作上多用混合固定液，其固定效果明显优于单纯固定液。 （1）中性甲醇液 可作常规固定液或标本保存液，脂肪染色此液固定。 （2）乙醇-醋酸-甲醇液（AAF液） 其特点是固定快速，对脂质、糖类、蛋白质等物质有很好的固定作用，避免了三种固定液单独使用引起的组织收缩或膨胀，是一种优良的混合固定液。 ;（3）乙醇-甲醛液（AF液） 适用于皮下组织中肥大细胞的固定。 固定后的组织不必经低浓度逐级乙醇脱水，可直接移入95%乙醇脱水，也不用水洗，缩短了脱水时间。 配方： 95%或乙醇脱色 90mL 40%甲醛 10mL （4）Bouin液 是一种常规用于活检标本固定的良好固定液，适用于大多数组织的固定，尤其适用于结缔组织染色。 （5）Zenker液 适用于一般组织固定，胞核和胞质染色均清晰，对免疫球蛋白染色最好，也可用于病毒包涵体、某些肿瘤标本的固定。 ;??四）固定的注意事项 1.及时固定 取材后立即将组织块放入固定液中 2.固定容器宜大 3.固定液应足量 4.防止组织变形 5.确定恰当的固定时间 固定时间应依据组织块的大小、厚度以及固定液的种类、环境温度而定。组织块大小为（1.0~1.5cm）×1cm×（0.2~0.3cm）时，固定时间以12~24h为宜。;三、洗涤、脱水、透明; （二）脱水 定义：将组织内的水分用某些化学试剂置换出来的过程称为脱水。 1.脱水的目的 组织块经固定和洗涤后，含有大量的水分，而水与苯、二甲苯等透明剂不混溶，故组织在透明前必须用能与透明剂相混溶的脱水剂（如乙醇），把组织内的水分置换出来，为下一步的透明做准备。 ;2.常用的脱水剂 脱水剂能同时以任何比例雨水和头，透明剂混合。常用的有：乙醇、正丁醇、丙酮等，其中乙醇最常用。 3.脱水的方法 一般把脱水剂配成各种浓度，自低到高浓度依次进行使组织中所含水分依次减少直致被脱水剂取代。 4.自动脱水机 ;（三）透明 定义：用某些化学试剂（如二甲苯等）将组织中的脱水剂置换出来，以利于浸蜡和包埋，因组织块浸入这些试剂后常呈半透明状，故称透明（或煤浸）。所使用的化学试剂称为透明剂。 1.透明目的 2.常用的透明剂 可使用的较多，有苯、甲苯、二甲苯（最常用）、三氯甲烷、汽油、香柏油（透明时间长达24h，所以不常用）等，多数透明剂对人体有害，使用时应注意防护。 3.常用透明方法 将脱水后的组织块先用乙醇-二甲苯混合液处理或直接浸入透明剂中，置换透明剂2~3次既能达到透明目的。;四、浸蜡和包埋 （一）浸蜡（透蜡） 定义：通过透明的组织块在融化的石蜡中浸渍，使组织块中的透明剂被完全置换出来的过程。 1.浸蜡的目的 用石蜡等支持物去置换、替代组织中的透明剂，使组织具有一定硬度，有利切片。 2.浸透剂的种类 常用的浸透剂有石蜡、明胶、火棉胶、树脂、碳蜡等，它们既是浸透剂又是包埋剂。 3.浸蜡方法 石蜡是最常用的浸蜡剂，，所以主要通过石蜡的浸蜡方法，以掌握浸蜡方法。 ;石蜡浸蜡方法 石蜡有高熔点和低熔点之分，一般使用的是熔点为56℃以上的石蜡。要显示酶和保存抗原活性性时，则需使用熔点为54℃以下的石蜡。常规制片普通用熔点为56~58℃旳石蜡。;（二）包埋 定义：用石蜡或其他包埋剂将组织包成一定形状，使其具有一定的硬度和韧度，便于切成薄片的过程，称为包埋。 （1）石蜡包埋法常用的有：常规石蜡包埋、胃镜标本的包埋、液体标