第八章 基因的表达与相关调控(下).ppt

蛋白激酶（PK）分类： 　　根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基种类分： 　　（1）丝氨酸/苏氨酸型 　　（2）酪氨酸型 　　（3）组氨酸型 　　根据是否有调节物参与蛋白激酶活性分： 　　（1）信使依赖型 　　（2）非信使依赖型　　　 (1). 在胞内介导胞外信号时具有专一应答特点。与信号传递有关的蛋白激酶类主要受控于胞内信使，如cAMP，Ca2+，DG（二酰甘油）等，这种共价修饰调节方式显然比变构调节较少受胞内代谢产物的影响。 (2).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化控制了细胞内已有的酶活性。与酶的重新合成及分解相比，这种方式能对外界刺激做出更迅速的反应。 (3).对外界信号具有级联放大作用； (4).蛋白质的磷酸化与脱磷酸化保证了细胞对外界信号的持续反应。 受cAMP水平调控的A激酶 C激酶与PIP2、 IP3和DAG CaM激酶与MAP激酶 酪氨酸激酶途径 蛋白质磷酸化与细胞分裂调控 第四节 蛋白质乙酰化对基因表达的影响 ?? 细胞内的染色质在乙酰化酶（HAT）的催化下，由乙酰CoA提供乙酰基，而被乙酰化修饰。去乙酰化酶（HDAC）催化其脱乙酰化。核小体组蛋白八聚体中，存在32个潜在的乙酰化位点，主要分布在H3和H4，其次为H2A和H2B。 组蛋白乙酰转移酶（HAT） HAT可分布在细胞核（A型）或胞浆（B型）。A型HAT复合物包括GNAT、MYST、p300/CBP、Basal TF、Nuclear Receptor Co-factors五大家族。因此，有些HAT同时也是转录因子或转录共激活因子. 组蛋白乙酰转移酶的分子结构 组蛋白乙酰转移酶超家族 组蛋白去乙酰化酶（HDAC） ? HDAC可分为三大亚家族： Class I —— HDAC1，2，3，8；Class II —— HDAC4 ~7，9~11；Class III —— SIR T1~7 启动子： 核心启动子(core promoter)TATA盒，-25—-30bp 上游启动子元件(upstream promotor elements,UPE)：CAAT 盒，-70bp；GC盒等，通过TF II复合物来提高转录效率。 增强子是指能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。远离转录起始点（1~30kb），增强启动子转录活性DNA序列。 1、增强效应十分明显。 2、增强效应与其位置和取向无关。 3、大多为重复序列，一般长约50bp。 4、 增强效应有严密的组织和细胞特异性。 5、 没有基因专一性。 6、 许多增强子还受外部信号的调控。 增强子的性质 一种观点认为，增强子为转录因子提供进入启动子区的位点。 第二种认为，增强子能改变染色质的构象。因为增强子区域容易发生从B-DNA到Z-DNA的构象变化。 增强子的功能是可以累加的。 增强子的作用原理 概念：为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控） 通用或基本转录因子(general transcription factors)：RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子。 TFⅡA、 TFⅡB、 TFⅡD、 TFⅡE等 特异转录因子( special transcription factors)：个别基因转录所必需的转录因子. OCT-2：在淋巴细胞中特异性表达，识别Ig基因的启动子和增强子。 反式作用因子(trans-acting factor) 从功能上分析其结构可包含有不同区域： 　　①DNA结合域(DNA binding domain) ：多由60－100个氨基酸残基组织的几个亚区组成； 　　②转录激活域(Transactivation domain) ：常由30－100氨基酸残基组成，这结构域有富含酸性氨基酸、富含谷氨酰胺、富含脯氨酸等不同种类，以酸性结构域最多见；　　 ③连接区:即连接上两个结构域的部分。不与DNA直接结合的转录因子没有DNA结合域，但能通过转录激活域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率。 螺旋-转折-螺旋（Helix-turn-helix，H-T-H） 锌指结构（zinc finger） 碱性-亮氨酸拉链（basic - leucine zipper） 碱性-螺旋-环-螺旋（basic – helix /loop /helix，bHLH） DNA结合结构域 是最早发现于原核生物中的一个关键因子，该结构域长约20个aa，主要是两个α-螺旋区和将其隔开的β转角。其中的一个被称为识别螺旋区，因为它常常带有数个直接与DNA序列相识别的氨基酸。 这类结构至少有两个α螺旋，其间由短肽段形成的转角或环连接，两个这样的motif结构以二聚体形式相连，距离正好相当于DNA一个螺距(3.4nm)，两个α螺旋刚好分别嵌入DNA的深沟。　　　 螺旋-