第三章_培养基与灭菌.pptVIP

第二节 消毒与灭菌方法 （二）化学方法 常用消毒剂 含氯消毒剂 过氧化物消毒剂 醛类消毒剂 环氧乙烷 醇类消毒剂 含碘消毒剂 酚类消毒剂 季铵盐类消毒剂 氯已定 高锰酸钾 高效消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂 第二节 消毒与灭菌方法 （三）生物方法 利用酶抑制或杀灭微生物。 （溶葡萄球菌酶、球孢链霉细胞外蛋白酶等） 第三节 影响消毒与灭菌的因素 处理剂量（强度）与时间 微生物的种类和数量 温度 湿度 酸碱度 化学拮抗物质 穿透力 第三节 影响消毒与灭菌的因素 处理剂量（强度）与时间 微生物的种类和数量 温度 湿度 酸碱度 化学拮抗物质 穿透力 剂量：化学消毒中的药物浓度 强度：热力消毒中的温度、电离辐射的强度等。 一般情况下：强度或剂量越大，效果越好。 但醇类例外，70%乙醇或50~80%异丙醇效果最好。 第三节 影响消毒与灭菌的因素 处理剂量（强度）与时间 微生物的种类和数量 温度 湿度 酸碱度 化学拮抗物质 穿透力 第三节 影响消毒与灭菌的因素 处理剂量（强度）与时间 微生物的种类和数量 温度 湿度 酸碱度 化学拮抗物质 穿透力 消毒因子必须接触到微生物才能起杀灭效果。 穿透力强的物质：电离辐射、微波、湿热、 环氧乙烷、戊二醛。 穿透力弱的物质：紫外线、甲醛。 工业生产上的灭菌方法有加热灭菌、化学药剂灭菌、射线灭菌等。 化学药剂灭菌、射线灭菌用于无菌间、培养室及车间空气灭菌。 干热灭菌：火焰灭菌、烘箱灭菌 加热灭菌 湿热灭菌：巴氏灭菌、间歇灭菌、 高压蒸汽灭菌 二、湿热灭菌原理 致死温度：指在一定条件下和一定时间内（10min）杀死微生物的最低温度。 致死时间：在致死温度下杀死全部微生物所需要的时间。 影响因素： 基质：糖、脂肪等保护；pH 7高，酸性环境敏感 菌龄：对数期最高 含水量：高－敏感 1.微生物的热阻 热阻：微生物对热的抵抗力。 微生物对湿热的相对抵抗力 微生物名称 大肠杆菌 细菌芽孢 霉菌孢子 病毒 相对抵抗力 1 3 ×106 2～10 1～5 2. 微生物的热死规律——对数残留定律 100℃时不同时间微生物存活数 时间 （min） 存活数 （个/mL) 时间 （min） 存活数 （个/mL) 0 6 7 9 11 9×107 1.2×107 8×106 5×106 3×106 15 20 25 30 1×106 2×105 2×104 ≈0 菌的死亡率（活菌的减少率）: 与任何时候残留的活菌数N 成正比。 对数残留定律： N—残留的活菌数（个） t—受热时间（min) K—反应速度常数（min-1) 将上式积分得： 两边取对数： 对数残留规律公式： —开始灭菌时原有活菌数（个） —经过t 时间灭菌后的残留菌数（个） 3.反应速度常数k 在相同温度下，k值愈小，则此微生物愈耐热。同一种微生物在不同温度下，k值也不相同，灭菌温度愈低，k值愈小，温度愈高，k值愈大。 121℃某些细菌芽孢的k 值 细菌芽孢名称 K 值min-1 枯草芽孢杆菌FS5230 硬脂嗜热芽孢杆菌FS1518 硬脂嗜热芽孢杆菌FS617 产气梭状芽孢杆菌PA3679 3.8～2.6 0.77 2.9 1.8 4．培养基灭菌温度的选择 灭菌过程中微生物的死亡属于化学反应中一级反应动力学类型，当其他条件不变时，反应速度常数与温度的关系可用阿累尼乌斯方程式表示： k=Ae-E/RT k—菌体死亡的速度常数（s-1）； A—阿累尼乌斯常数；e =2.71 E—杀死细菌所需的活化能（×4.18J/mol） T—绝对温度（K）； R—气体常数[1.987×4.18J/(mol·K)] 培养基成分破坏也属于一级动力学反应，当其他条件不变时，反应速度常数与温度的关系也可用阿累尼乌斯方程式表示： k’=Ae-E’/RT k’—培养基成分破坏速度常数（1/秒）； E’—反应所需活化能（J/mol）； 在灭菌时，当温度变化，菌死亡速度常数k和培养基成分破坏速度常数k’都变化，温度由T1 升到T2 时，k 值分别为： 将两式相除并取对数得： 同样，灭菌时培养基成分的破坏