色谱分析法导论教学时数6学时教学要求1色谱法分类2.PDFVIP

第 11 章 色谱分析法导论 教学时数：6 学时 教学要求： 1. 色谱法分类 2. 熟练掌握色谱分离方法的原理 3. 色谱法的流出曲线和有关术语 4. 熟悉塔板理论和速率理论的主要内容。能够利用塔板理论和速率理论方程判断影响色 谱分离各种实验因素 5. 分离度 教学重点与难点： 1. 色谱法基本原理。色谱法的分类。色谱分离过程及常用术语。 2. 色谱分离效能指标。塔板理论与速率理论。理论塔板数(n)及有效理论塔板数(neff)和 塔板高度(H)及有效塔板高度(Heff) 的计算 3. 分离度和影响分离度的重要色谱参数 11-1 概述 一. 色谱法的由来 1. 1906 年由俄国植物学家 Tswett 创立 1906 年，俄国植物学家 Tswett 发表了他的实验结果，他为了分离植物色素，将植 物绿叶的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中，并用石油醚自上而下淋洗，由 于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同，随着淋洗的进行，不同色素向下移动的 速度不同，形成一圈圈不同颜色的色带，使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法 命名为色谱法（chromatography ）。在此后的 20 多年里，几乎无人问津这一技术。到了 1931 年，Kuhn 等用同样的方法成功地分离了胡萝卜素和叶黄素，从此，色谱法开始为 人们所重视，此后，相继出现了各种色谱方法。 固定相：在色谱柱中一相固定不动，可以是固体，也可以是液体。 流动相：是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体）。 色谱柱：各种材质和尺寸（铜，不锈钢，玻璃；U 形，螺旋形） 被分离组分：不再仅局限于有色物质。 2. 色谱法 当流动相中携带的混合物经过固定相时，就会与固定相相互作用。由于各组分在性质和 结构上的差异，与固定相发生相互作用的大小，强弱的差异，因此，随着流动相的移动， 混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而 按一定次序从固定相中流出。这种借再两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技 术，称为色谱法。实质：分离。 二. 分类 色谱法有多种类型，从不同的角度可以有不同的分类法。 1. 按两相分子的聚集状态分 分类 流动相 固定相 类型 液相色谱 液体 固体 液- 固色谱 液体 液体 液-液色谱 气相色谱 气体 固体 气- 固色谱 气体 液体 气-液色谱 2. 按固定相的固定方式分类 填充柱色谱 柱色谱 毛细管柱色谱 纸色谱 平面色谱 薄层色谱 高分子薄膜色谱 3. 按分离机制分 吸附色谱法(利用吸附剂表面对不同组分的物理吸附性能的差异进行分离)； 分配色谱法 (利用不同组分在两相中有不同的分配来进行分离)； 离子交换色谱法 (利用离子交换原理)； 排阻色谱法 (利用多孔性物质对不同大小分子的排阻作用)等。 三. 色谱法的特点 1. 色谱法的优点 A: 分离效率高。几十种甚至上百种性质类似的化合物可在同一根色谱柱上得到分离， 能解决许多其他分析方法无能为力的复杂样品分析。 B: 分析速度快。一般而言，色谱法可在几分钟至几十分钟的时间内完成一个复杂样品 的分析。 C: 检测灵敏度高。随着信号处理和检测器制作技术的进步，不经过预浓缩可以直接检 测 10-9g 级的微量物质。如采用预浓缩技术，检测下限可以达到 10-12g 数量级。 D: 样品用量少。一次分析通常只需数纳升至数微升的溶液样品。 E: 选择性好。通过选择合适的分离模式和检测方法，可以只分离或检测感兴趣的部分