液相色谱汇.ppt

高效液相色谱法：以液体作为流动相的色谱法。它是在经典液相色谱实验基础上，引入气相色谱的理论，在技术上采用高压输液泵，高效固定相和高灵敏的检测器，而发展起来的快速分离分析技术。具有分离效能高，检出限低，操作自动化和应用范围广的特点。 液相色谱仪 (一)、HPLC与经典LC区别 (二)、HPLC与GC异同点 流动相差别 GC：流动相为惰性气体 组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用。 HPLC：流动相为液体 组分与流动相和固定间有亲合作用力，为提高柱的选择性、 改善分离度增加了因素，对分离起很大作用。 流动相种类较多，选择余地广 流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相 可以增大分离选择性 流程及主要部件 三、高效液相色谱法的特点和应用 四、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC 2.主要部件 (2)梯度淋洗装置 (3) 进样装置 (4) 高效分离柱 一、液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatograph 二、液-液分配色谱 liquid- liquid partition chromatograph 三、离子交换色谱 ion-exchange chromatograph 四、离子对色谱 ion-pair chromatograph 五、排阻色谱 size- exclusion chromatograph 六、亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 一、 液-固吸附色谱liquid-solid adsorption chromatography 二、 液-液分配色谱liquid- liquid partition chromatography 固定相有机基团主要有三类：1.疏水基团:如不同链长的烷烃（ C8 ，C18 ，C6等）。2.极性基团：如丙胺基，氰乙基，醚和醇等。3.离子交换基团：如作为阴离子交换基团的胺基，季铵盐。作为阳离子交换基团的磺酸基等。 三、 离子交换色谱ion-exchange chromatography 离子色谱仪 离子色谱法 principle of IC 离子色谱装置类型suppressed apparatus of IC 离子色谱连续抑制装置图 离子色谱具有以下优点 离子色谱的应用 application of IC 四、 离子对色谱ion pair chromatography 六、 排阻色谱size- exclusion chromatography 七、 亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 一、液相色谱固定相 stationary phase of HPLC 二、液相色谱流动相 mobile phase of HPLC 一、液相色谱固定相 stationary phases of LC （3）化学键合固定相 化学键合固定相的特点 2. 液-固吸附分离固定相 3. 离子交换色谱分离固定相 4. 空间排阻分离固定相 二、液相色谱的流动相 Mobile phases of LC 2. 流动相类别 3. 流动相选择 4. 选择流动相时应注意的几个问题 一、影响分离的因素 factors influenced separation 2.流速 二、分离类型选择 choice of separation types B. 光电二极管阵列检测器 光电二极管阵列检测器 示差折光检测器 Differential Refractive Index Detector c. 示差折光检测器（differential refractive index detector） 示差折光检测器 荧光检测器 荧光检测器特点：（fluorescence detector） 电化学检测器 安培检测器：随着化合物被氧化或还原，产生正比于浓度的电流 电导检测器 Conductivity Detector 四、制备型液相色谱 preparative liquid chromatography 2. 液相制备色谱的方法 一、超临界流体色谱的特点与原理 feature and principle of SFC 二、超临界流体色谱仪的结构流程 structure and general process of SFC 三、超临界流体色谱的应用 application of SFC 一、超临界流体色谱的特点与原理Principle and character of supercritical fluid chromatography 2. 超临