3种梅毒血清学检测方法在临床中应用价值.docVIP

3种梅毒血清学检测方法在临床中应用价值 　　摘 要 目的：比较3种梅毒血清学检测方法在临床中的应用价值。方法：梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清标本中的梅毒螺旋体特异性抗体，应用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测血清标本中的非特异性抗体。结果：TPPA、ELISA、TRUST敏感性分别为97.96%、98.98%、81.63%；特异性分别为96.67%、91.11%、80%。结论：TPPA适合做确证试验，ELISA可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法，TRUST适合用于判定病情及疗效观察。 　　关键词 梅毒螺旋体 TPPA ELISA TRUST 　　 　　梅毒（TP）是由苍白螺旋体引起的性传播疾病，其传染性强，危害性大，感染后可引起全身各组织器官的损害。梅毒主要是通过性接触传播，也可经输血感染或胎儿垂直传播，近年来我国梅毒感染率呈大幅上升趋势【sup】［1］【/sup】，严重危害患者的健康和生命安全。2008年卫生部公布27种法定报告的甲、乙类传染病中，梅毒发病由原来的第7位上升至第5位。目前，血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一，所以选择好的检测方法有利于梅毒早期的诊断和及时治疗。我科将TPPA、ELISA、TRUST 3种检测方法结果进行了比较，现报告如下。 　　 　　资料与方法 　　一般资料：本组资料选择2009年5月～2011年3月我院门诊及住院确诊的梅毒患者98例，男46例，女52例；梅毒潜伏期或既往感染者36例，现症者62例。另选择90例非梅毒患者，均为我院住院病人，其中自身免疫性疾病患者40例，妊娠孕妇25例，健康对照25例。 　　试剂与主要仪器：TRUST试剂由上海荣盛生物技术公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，ELISA试剂由厦门新创科技公司提供，上述试剂均在有效期内使用。主要仪器为酶标仪、洗板机、离心机、微量振荡器、加样器和恒温水浴箱等。 　　方法：3种试验严格按试剂盒说明书操作步骤进行检测，并在试剂盒有效期内使用。 　　统计学方法：数据采用SPSS13.0软件包进行统计分析，计数资料采用X【sup】2【/sup】检验，3种试验多因素检测比较采用t检验。 　　 　　结 果 　　3种方法检测98例梅毒患者血清抗体结果：TPPA有96例阳性，敏感性为97.96%；ELISA有97例阳性，敏感性为98.98%；TRUST有80例阳性，敏感性为81.63%。而TPPA的假阴性为2.04%，ELISA假阴性为1.02%，TRUST假阴性为18.37%。 　　3种方法检测90例非梅毒患者血清结果：在90例非梅毒患者中，TPPA阳性有3例，阴性有87例，其特异性为96.67%；ELISA阳性有8例，阴性有82例，特异性为91.11%；TRUST阳性有18例，阴性有72例，特异性为80%。见表1。 　　 　　讨 论 　　感染梅毒螺旋后机体产生的抗体：人体感染梅毒螺旋后机体产生两类抗体，一类为抗密螺旋体的特异性抗体，感染2～4周后即可检出；另一类为非特异性类脂质反应素抗体，即抗心磷脂抗体，又称反应素多为IgA和IgM混合型抗体。检出的时间要比特异性抗体的时间约迟2周（感染后约6周）【sup】［2］【/sup】。梅毒特异性抗体出现早、消失迟，即便经过治疗，仍可检出其特异性抗体，甚至可终身检出，这是诊断梅毒螺旋体感染的依据。非特异性抗类脂质抗体出现较晚，经过治疗可逐渐减少至转为阴性，可用于疗效观察。 　　TPPA检测：TPPA是将纯化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工载体明胶粒子上，检测血清中相应的抗体，其特异性好、灵敏度高、抗干扰性强。本结果显示，TPPA敏感性为97.96%，特异性96.67%，与文献报道一致【sup】［3］【/sup】。TPPA法已是目前公认的梅毒血清确证试验，但试剂较贵，试剂溶解后需在几天内用完，否则造成浪费。TPPA测定需多步稀释，操作较繁琐、检测时间较长，且以肉眼判断结果，常有主观色彩，原始数据无法保存，不适于大批量的筛选试验，因此TPPA适用于对ELISA或TRUST检测后的阳性标本进行确证试验。 　　ELISA检测：ELISA法采用双抗原夹心法检测TP特异性抗体，利用酶放大效应，提高检测的灵敏度，对梅毒各期的检出率都较高，而且ELISA试剂成本较低，操作方便，可使用全自动酶标仪，原始数据易于保存。本组实验表明，ELISA有很高的敏感性和特异性，分别为98.98%和91.11%，与TPPA相接近。ELISA的假阴性率很低，本组假阴性率仅为1.02%，与文献报道基本一致【sup】［4］【/sup】。但抗干扰性仍不如TPPA，结果会出现一定假阳性，由于其检测是梅毒的IgM和IgG混合抗体，梅毒