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PKI全自动核酸提取技术在临床PCR的应用.pdf

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PKI全自动核酸提取技术在临床PCR的应用

全自动核酸提取技术 在临床PCR中的应用 2013月11月 黄道培 11 ©©©© 2009 PerkinElmer2009 PerkinElmer2009 Pe2009 PerkrkinElmeinElmerr 核酸检测在临检PCR中的十二字经 核酸检测在临检PCR中的十二字经 22 可用于临检二种PCR技术 可用于临检二种PCR技术 •实时荧光检测法 •实时荧光检测法 •终点检测微流芯片技术 •终点检测微流芯片技术 33 病毒载量:HBV,HCV,HIV 病毒载量:HBV,HCV,HIV 检测目标:DNA, RNA 检测目标:DNA,RNA 检测目标:DNA, RNA 检测目标:DNA,RNA 检测标准:Real Time 检测标准:Real Time /End Point 检测标准:Real Time 检测标准:Real Time /End Point 检测下限:1000IU/ml 检测下限:30IU/ml 检测下限:1000IU/ml 检测下限:30IU/ml 检验准确性:比较差 检验准确性:优良 检验准确性:比较差 检验准确性:优良 使用全自动设备 使用全自动设备 44 题目 PCR技术在血液筛查中的应用 核酸样品制备对临检PCR的重要性 核酸样品制备对临检PCR的重要性 • 尽可能用完样品 • 尽可能用完样品 (100ul) (100ul) • 固化样品及增加洗脱率 • 固化样品及增加洗脱率 • 通用捕集法 • 通用捕集法 55 P6 样品制备主要方法 样品制备主要方法 66 手工DNA提取方法——沉淀法或硅胶膜柱法 手工DNA提取方法——沉淀法或硅胶膜柱法 硅胶膜:高盐低pH值结合核酸, 低盐高pH值洗脱。 可减少有机溶剂的使用 纯度高,得率好 需要多步离心 硅胶膜易

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