第四章育种出发菌株的获取与选择与来源2.pptVIP

（4）采用一定的筛选模型进行筛选（最好能利用平板培养初筛） （5）如何将微生物的代谢产物与平板技术相结合，高效地初筛工业微生物菌株？ （7）菌种筛选培养基的一般成分有哪些？ （1） 分类及菌种鉴定基本知识 ①种以上的系统分类单元 界 Kingdom 门 Phylum（或Division）——亚门 纲 Class ——亚纲 ——超目 目 Order ——亚目 科 Family ——亚科 ——族 ——亚族 属 Genus 种 Species ②种的概念 定义：种是一个基本分类单位，是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属内其他种有明显差异的菌株的总称。在微生物中，一个种只能用该种内的一个典型菌株作为具体标本，它就是该种的模式种。 新种： sp.nov.或nov. sp.，新被鉴定的种发表时应在其学名后标上sp.nov.的符号，新种发表前应将其模式菌株的培养物存放在一个永久性的保藏机构，并应允许人们从中取得。 ③微生物的命名 命名：菌种的科学名称。菌种的学名是按照《国际细菌命名法规》命名的国际学术界公认，并通用的名称。 命名原则： 学名=属名+种的加词+（首次定名人）+现名定名人和现名定名年份 规定与常识：属名应大写首字母、单数、可以组合而成。种的加词代表一个种的次要特征，首字小写。 亚种（subspecies）： 种的进一步细分，一般指其某一方面稳定的特征与模式 种不同的种常在种名、署名的加词后写上subsp.然后再 写具体亚种的加词； 变种（ variety）： 容易引起混乱； 型（form）： 使用中用型作为后缀；表示细菌菌株，现已作废； 类群（group）： 没有分类地位非正式地指定一组具有某些共同性状的生物； 菌株（strain）： 表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极 其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。 （2）菌种分类鉴定主要步骤 纯化、 测定一系列必要的指标：各大类有各自重点指标，真菌以形态为主，酵母和放线菌则以形态与生理兼用，细菌较多使用 生理指标。 查找权威性鉴定手册： [鉴定技术四个水平：细胞形态和习性水平， 细胞组分水平，蛋白质水平，基因或DNA水平] 原核生物分类系统纲要——伯杰氏系统细菌学手册 真菌界分类系统很多，各国采用不同的系统，比较混乱。近年来为较多人接受的是Ainsworth的纲要。 微生物数码分类表（统计分类法） ③数值分类法 即统计分类法：在200年前M. Adanson（1727-1806，法国植物学家）发表的分类原理基础上结合现代计算机技术发展而来的。 定义：通过广泛比较分类单位的性状特征，然后计算它们之间的相似性，再根据相似性的数值划分类群的一种分类方法。 主要观点： 在一个分类群中，其所含信息量越大，即分类所依据的性状越多，其分类效果也越好； 顺序建立自然分类单元时，每个性状都是等权的； 任何两分类实体间的整体相似性，都是由每一对的相似性计算而来的；能够由类群间相似性的差异识别不同的分类实体； 如果给予有关进化途径和机制的某些假定，可以从组群的分类学结构或从性状相关上作出种系发生的推论； 分类学应作为一门经验科学来看待和实践； 数值分类学是以表象相似性为基础的。 举例：蜜柚脱苦酶产生真菌鉴定 8天，表面恢复苍白色，由于培养基中溶出的色素增多，使得培养基背面呈深褐色。菌丝体表面会出现粉状的颗粒，所以判断其繁殖器官为分生孢子或粉孢子，菌丝体绒毛状 过氧化氢酶（接触酶）试验 细胞色素氧化酶测定 细胞色素氧化酶是氧化酶的一种，人们习惯将其称为氧化酶。所以在细菌分类鉴定中所说的氧化酶就是指细胞色素氧化酶。氧化酶在有O2和细胞色素C存在时，可氧化对氨基二甲基苯胺，使其呈玫瑰色至暗紫色，在此基础上还能与α-苯酚结合而出现蓝色。 未出现红色或蓝色，可判断为阴性。 鉴定小结 分离到了能分解纤维素的细菌，得到了纯培养。 细菌时革兰氏阴性菌，菌落特征粉红色或浅黄色，好氧型，过氧化氢酶阳性，细胞色素氧化酶阴性，对照《伯杰氏手册》可初步判断分离出的菌种是噬纤维菌属。 下一步应提取16sRNA，根据16sRNA的序列特征确定该菌的归属直至确定种; （4）细菌鉴定方法 ①细菌常规鉴定 形态及生理生化鉴定 蛋白质水平鉴定（免疫诊断、蛋白质图谱分析） （5）酵母菌的鉴定 ①经典的酵母鉴定方法 ②试剂盒及自动化检测 ③酵母酶谱检测 ④酵母的分子鉴定 （6）丝状真菌的鉴定 ①形态学鉴定 是否有性生殖