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应用报告 LC012
HPLC 分析食品中苯甲酸和山梨酸
苯甲酸和山梨酸是两种广泛用于食品中的防腐剂，用于防止食品中的细菌生
长。我们参考GB/T 23495-2009，采用上海舜宇恒平科学仪器有限公司的LC1620A
液相色谱仪对碳酸饮料和蜜饯中的苯甲酸和山梨酸进行含量测定，获得良好的检
出灵敏度和分离效果，完全满足国家标准的检测要求。
一、 实验部分
1.1 仪器与试剂
LC1620A 液相色谱仪，配紫外检测器
FA2004 电子分析天平
甲醇，色谱纯
氨水（1+1）：氨水和水等体积混合
二次蒸馏水
苯甲酸、山梨酸标准品
1.2 色谱条件
色谱柱：Shodex 120-5-4E C18 ，4.6*250mm ，5um
流动相：甲醇：0.02mol/l 乙酸铵=5：95
检测波长：230nm
流速：1.0ml/min
1.3 样品溶液准备
1.3.1 标准品储备配制：准确称取苯甲酸和山梨酸标准品0.05g （精确至0.0001g ），
置于 100ml 容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成500ug/ml 的标准储备
液。
1.3.2 标准使用液配制：按实际需要将标准储备液用水逐级稀释成不同浓度的标
准使用液，临用前配制。
1.3.3 样品溶液制备 （参考GB/T 23495-2009 ）
1.3.3.1 碳酸饮料样品：取一定量碳酸饮料样品置于锥形瓶中，超声波脱气 15min
除去二氧化碳后，称取 10g 于25ml 容量瓶中，用氨水（1+1）调节pH 近中性，
用水定容至刻度，经0.45um 有机系滤膜过滤，作为样品溶液。
1.3.3.2 蜜饯样品：取 1g 蜜饯样品，加水适量，转移至25ml 容量瓶中，加水至
20ml 左右，置于60~70℃水浴中加热片刻，剧烈震摇使其分散均匀，加氨水（1+1）
调节pH 近中性，震摇分散均匀后再置于 60~70℃水浴中加热30min，取出后趁
热超声提取5min，用水定容至刻度，经0.45um 有机系滤膜过滤，作为样品溶液。
1.4 样品测试
按色谱条件进样分析样品，进样量为10ul 。
二、 结果与讨论
1、碳酸饮料中苯甲酸和山梨酸的含量测定。
配制160ug/ml、80ug/ml、40ug/ml 、20.0ug/ml 、10.0ug/ml、4.0ug/ml 标准品
溶液，制作标准曲线，结果见表1 和图1，图2 。
表1 不同浓度标准品峰面积
浓度 4 10 20 40 80 160
苯甲酸 12228 32594 64064.7 125264.9 232888.9 475557.9
山梨酸 22394.8 58646.6 116785.3 227906.1 426007.9 870771.5
图1 苯甲酸和山梨酸标准曲线图
苯甲酸：y = 2943.9x + 3036.1 R2 = 0.9996
山梨酸：y = 5394.2x + 4789.4 R2 = 0.9996
103.00
[mAU] 酸
梨
山
80.80
酸
甲
苯
58.60
36.40
14.20
-8.00
0.00 1.90 3.80 5.70 7.60 9.50 11.40 13.30 15.20 17.10 19.00
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