人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养共67张PPT.ppt

展望 探究更多的环境因素的影响，如：对土壤的矿质元素,光照强度等进行分析，探究适合丹参酮ⅡA含量的最佳培养条件，用于提高农业生产产量。 参考文献 [1] 郭宝林，林生，冯毓秀等。丹参主要居群的遗传关系药材道地性的初步研究。中草药，2002,33(12):1113-1116 致 谢 衷心感谢对本实验进行指导的 所有老师和在座的评委老师! * * * * * * * * * * 各位评委老师大家好 下面由我为各位介绍我们的实验—环境因素对中江丹参丹参酮含量及其合成相关基因表达的影响 * 首先，为各位介绍我们的实验对象——丹参、 丹参系唇形科鼠尾草属植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)的干燥根及根茎,是中国沿用已久的传统中药之一，用于治疗心血管病,具有活血养血和益气作用。丹参主产于四川、安徽、江苏及河南等省。 四川中江是丹参的主要产地之一，而近年来，过渡采挖,其野生资源濒临枯竭, 栽培品已经成为丹参的主要来源。然而不同地区丹参药材质量差别很大,栽培丹参的生长周期长且有效成分含量低等,这些不足都给临床使用和质量控制带来一定困难。 究竟在什么环境中培养出的丹参药材药用价值最高呢？我们开始进行进一步的研究，通 * * 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂（70%酒精等） 紫外线 针对不耐高温的液体 接种室、超净工作台 能耐高温的，需要保持干燥的物品 灼烧法 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 接种工具（接种环等） 吸管 实验操作者的双手 培养皿等玻璃器皿 培养基 1、消毒方法 2、灭菌方法 干热灭菌 本实验目的：用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养 阶段1：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 阶段2：纯化大肠杆菌 三、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一 起加热? 可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于 水中，减少误差。 1．计算 2.称量 3．溶化 ②加琼脂的目的是什么? 仅作为凝固剂 4、调pH 5、分装 6．灭菌： 将培养基转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅。 将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么？ 在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞， 在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中 杂菌污染的作用。 ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 不能，因为培养皿要保持干燥，应该用 干热灭菌。 7、倒平板 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以避免培养基表面的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。