人教版选修1专题3课题2月季的花药培养共21张PPT1.ppt

月季的花药培养 花粉粒 ①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药； ②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉； ③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。 １）花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾， ２）花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。 * * * * * （一）被子植物的花粉发育 花粉囊 花粉 花粉是由 经过 而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉母细胞（小孢子母细胞） 减数分裂 1.来源： 2.形成过程 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 减数分裂 4个小孢子 （小孢子四分体时期） （单核期） 单核靠边期 单核居中期 彼此分离 有丝分裂 2个精子 有丝分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 生殖细胞 营养细胞 （双核期） 有丝分裂 在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生 个精子。 8 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 1花粉母细胞 4个营养细胞 4个生殖细胞 两个精子和一个营养核的基因型 。 相同 ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 一个成熟的花粉粒，有两种情况： 小孢子母细胞 4个小孢子 四分体时期 1个小孢子 单核居中期 1个小孢子 单核靠边期 花粉粒 双核期 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 （二）产生花粉植株的两种途径 这两种途径的区别主要取决于培养基中 的种类及其 的配比。 浓度 激素 在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构（胚芽、胚根、胚轴等结构完整），发育过程亦与合子胚类似，被称为胚状体。 花粉植株： 即单倍体植株 胚状体： （体细胞胚） （花粉胚） 三 影响花药培养的因素 花期早期；单核居中期与靠边期之间 培养基的组成 材料的选择 亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等 适宜的培养条件等 〖思考〗为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 亲本植株的生理状况 答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 （一）材料的选取 实 验 操 作 1、选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法： 醋酸洋红法； 焙花青－铬矾法 （蓝黑色） 二、材料的消毒： 花蕾 （70％酒精） 大约30s （无菌水） 清洗 （无菌吸水纸） 吸干水分 （1％氯化汞溶液） 2～4min （无菌水） 冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 实 验 操 作 （三）接种和培养 在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成 1、剥离花药 ①勿损伤花药，否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织 注意： 2、接种 3、培养 ①培养条件： 愈伤组织 转移到分化培养基上 温度 光照 ②培养： 4、鉴定和筛选 染色体倍性的变化 胚状体 在花药开裂后尽快将幼小植株 分开，分别转移到新的培养基上 每瓶接种花药7-10个 为何花粉植株常出现染色体数目的变化？ 花粉细胞的融合 接种花粉过程中混有小孢子母细胞 在材料的低温处理时抑制了纺锤体的形成 双核期时，生殖细胞核和花粉管细胞核并没有形成两个细胞，而是两个核发生了融合 课题成果评价 选材是否恰当 选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。 无菌技术是否过关 如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。 接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 植物组织培养技术与花药培养技术的异同 相同之处是： 培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同 两者不同之处在于： * *