人教版选修一专题二课题二分离以尿素为氮源的微生物共28张PPT.ppt

细菌 尿素 NH3 中性 碱性 酚红颜色： 黄色 紫红色 变色范围是pH6.4-8.2 细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的氨使培养基变碱，于是酚红由黄变红。随着培养时间的延长，红色区域的面积越来越大。 （一）制备培养基： 全培养基、 尿素培养基 （二）制备细菌悬液 制备成10-2、10-3、10-4、10-5土壤稀释液 实验组 对照组 倒平板 需要倒3个LB平板，9个尿素平板 LB(对照) 尿素 10-2 10-3 10-4 每个稀释度 1个LB对照平板 3个尿素平板(平行重复组) （四）实验结果1 全培养基 尿素培养基 10-2 10-3 10-4 10-5 （四）实验结果2 全培养基 尿素培养基 10-2 10-3 10-4 恒温37℃培养 LB培养基上10-2、10-3、10-4 、10-5稀释度土样涂布结果 尿素培养基上10-2、10-3、10-4 、10-5稀释度土样涂布结果 配制菌悬液 1个99ml无菌水 2个9ml无菌水 得10-2, 10-3, 10-4的菌悬液 1g土壤 稀释菌悬液 （使用1000μL） 高浓度→低浓度，换枪头 涂布分离 低浓度→高浓度，可不用换枪头 涂布分离 涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？ 微量移液器的使用 第一档 第二档 严禁超越两端极限量程 使用结束后，将刻度调回最大量程 微量移液器的使用 练习题 1、选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 阻止 特定 抑制 2、常用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。 显微镜 稀释度 细菌 30-300 3、在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 平均数 4、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中．得到以下几种统计结果，正确的是 A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233 D 5.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ A 分解纤维素的微生物的分离与鉴定 二、实验原理 土壤有“微生物的天然培养基”之称，土壤中含有大量的不同类型的微生物。可用选择培养基(利用微生物的特性,配制成适合于某种微生物生长,而限制其他微生物生长的培养基)选择一些特定的微生物进行分离培养，并能对特定的微生物类群进行数量测定。 基本原理是通过稀释使菌体细胞充分分散，单细胞得以生长发育形成菌落。 可使用稀释涂布接种细菌，并可通过平板菌落计数，推算单位重量土壤样品含有某种菌的数量。 二、实验原理 选择培养基选择一些特定的微生物进行分离培养，为了得到数量较多的特定的微生物，可以进行富集（增殖）培养。培养后的分解纤维素的微生物可以用刚果红染色法进行鉴别。 刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 二、实验原理 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。在特定环境中只让 1种来自同一祖先的微生物群体生存的技术叫做纯化。(获得单菌落） 分离纯化的方法：稀释涂布平板或平板划线等