人教版高中生物选修一2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件5共56张PPT.ppt

8.幽门螺旋菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 请回答： （3）在培养时，需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养，将导致 。 （4）临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp?，其基本原理是Hp能将14C标记的 分解为NH3和14CO2?。 恒温培养箱 无法形成单菌落 尿素 之后讲课本P22的最上面内容 二、实验设计： 土壤取样 制备培养基 样品稀释 取样涂布平板 微生物培养、观察 菌落计数 二.实验设计 ㈠.土壤取样 同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。 ◆取样要求：先铲去表层土3cm左右，再取样 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 P25 ㈡.制备培养基： 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。 （三）样品的稀释 ◆应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。 P25 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。 ◆在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。以保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。 细菌稀释度为104、105、106 放线菌稀释度为103、104、105 真菌稀释度为102、103、104 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？ 原因：土壤中各类微生物的数量是不同的。 结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。 测定土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释。其原因是（ ） A.细菌个体小，真菌个体大 B.细菌易稀释，真菌不易稀释 C.细菌在土壤中的数量比真菌多 D.随机的，没有原因 C ◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。 ㈣.取样涂布 ㈤.微生物的培养与观察 在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间： 细 菌：30～37℃ 培养1～2d 放线菌：25～28℃ 培养5～7d 霉 菌：25～28℃ 培养3～4d 一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种我微生物表现出稳定的菌落特征。包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。 菌落特征可作为菌种鉴定的重要依据。 微生物的培养与观察 〖思考〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被 感染，实验后一定要洗手。 致病微生物 三、操作提示 P25 1、无菌操作 2、做好标记 3、制定计划 ◆为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先制定计划。 四.结果分析与评价 (一）培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落 通过对照实验，若培养物有杂菌污染，对照的培养基菌落数偏高； 若培牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数远大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。 （二）样品的稀释操作是否成功及重复组的结果是否一致 提示：如果得到了2个或2个以上菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明实验不精确，需要重新实验。 五.课外延伸 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。 测定饮水中大肠杆菌数量的方法-滤膜法。是将一定体积的水过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。 大肠杆菌呈 黑色中心 ,有或无金属光泽 大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征 本课题知识小结: 1．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（ 　） A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 h D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 实践训练 D 2.判断： 利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种