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人教版高中生物选修一3.1菊花的组织培养课件共39张PPT
1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗? 答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。 (四)培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h (五)移栽 移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 3、移栽 幼苗长壮后,移栽到土壤中 固体基质型,含水量高、 蓄水性强、透性好,适合栽培 珍珠岩 ,珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩,经急剧冷却而成的玻璃质岩石,有弧形或圆形裂隙,如珍珠的结构,所以被命名为珍珠岩 。 蛭石是一种天然、无毒的矿物质,在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物,属于硅酸盐。 (六)栽培 幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花 三、课题延伸 1、一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养 2、实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 作业:P36 1、在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是,为什么要选取生长旺盛的嫩枝? 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 本课题内容小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化 细胞全能性 组织培养过程 营养 激素 环境条件 MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 * 我国的传统名花和世界四大切花之一:菊花 扦插 嫁接 压条 菊花的组织培养 指在无菌和人为控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 一、植物组织培养的概念 细胞离体 ①必要条件: 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 A.外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官. ③相关概念: B.脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。 C.再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程 D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞. 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 二、植物组织培养的基本过程 三、影响植物组织培养的因素 (1)植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 (2)离体的植物组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配制不同的培养基 MS培养基主要成分包括: A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、有机物、植物激素 MS固体培养基成分及比例 讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持培养基的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 ①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素类: 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA) 细胞分裂素类: 激动素(KT)、6-苄基嘌呤( 6-BA)、玉米素(ZT) 赤霉素类: 赤霉酸(GA3) (3)植物激素的影响 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但不利
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